跪求脐带间充质干细胞分化鉴定方法步骤，急急！！！

iytbxxg

要做脐带间充质干细胞分化鉴定，不知从哪里找实验方法和步骤，求各位大侠把相关方法步骤赠送，在此跪谢了！！！

jack1381818

暨南大學學報醫學版 2009 第4卷 p367-372/ j& n/ k) J  F7 l; d4 a. p
http://wenku.baidu.com/view/2d1cbc8b6529647d2728521d.html* l9 Q$ m, ]: F' D3 t
或許有想要的

iytbxxg

还可以，还在学习中，多谢

细胞海洋

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, c# p) e" t2 O& S5 @' K+ Z* C3 }3 p% Y! u+ X
http://www.stemcell8.cn/forum-34-1.html

wuhuaguo88l

这篇文献也许能提供一些帮助

edwardellen

分化诱导基本就是换成条件培养基培养，之后做染色鉴定。
! W% b' Q1 W9 K4 H/ I(1)诱导向成神经元的分化) v. i6 I. N0 ~; H, U- z; J
用含有3mmol/L β-巯基乙醇、5×10-7mol/L视黄酸（RA）的DMEM/F12预诱导24h，再用含5%FCS的DMEM/F12培养7d左右，检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达。
9 S5 K* P! A6 X0 Q3 X7 e) [8 C(2)诱导向成肌细胞的分化
/ ?: L. N# e) B% z( f! A用1×10-4mol/L 5-氮杂胞苷诱导24h，然后用含有10μg/LbFGF的无血清DMEM/F12诱导2周左右，检测肌动蛋白actin 的表达。: p2 m( g) z" a
(3)成脂诱导分化及油红O染色
1 X" W- ]1 n3 H* A/ M( y4 d细胞融合达70％时，去掉原培养基，PBS洗涤1次。以含有浓度为1 μmol/L地塞米松、浓度35 nmol／L胰岛素、浓度200 μmol/L吲哚美辛和体积分数为5％FBS的H-DMEM向脂肪细胞诱导，每3-4 d换液1次，观察到胞质中有脂滴形成时，吸去培养液，PBS洗涤2次，体积分数4％多聚甲醛固定15min，以质量分数为0.375％油红O染色20 min，苏木素复染2-5 min，显微镜下观察、拍照。
3 S# n7 @- x+ q7 I(4)成骨诱导分化的形态变化及碱性磷酸酶染色
, \' h7 i6 r; E- w细胞融合达60％时，去掉原培养基，PBS洗涤1次，以含有浓度0.1 μmol/L地塞米松、浓度10 mmol/Lβ-磷酸甘油、浓度50 μmol/L抗坏血酸和体积分数为10％FBS的DMEM/F12向成骨细胞诱导，每3-4 d换液1次。诱导3周后，吸去培养液，PBS洗涤2次，体积分数95％酒精固定10 min，水洗数次，放入碱性磷酸酶染色剂中，孵育4-6 h，自来水冲洗数次，质量分数2％硝酸钴反应5 min，质量分数1％硫化铵反应5 min，蒸馏水冲洗。显微镜观察，拍照。