练习小鼠骨髓移植

hyde

想练习小鼠骨髓移植，求高手指教
; L9 o0 ~: d+ }" f$ k& s( D1，首先是收集小鼠（带GFP）骨骼，敲碎洗出细胞，过滤，离心。（几只小鼠比较合适）; Z2 o* \& P' Q/ y3 y# u
2，可以直接移植分离的全部细胞吗？应为分选要好多抗体，一时半伙凑不齐？
; f, Y0 S( a5 W; f7 L4 u1 }+ n, I3，受体小鼠可以不辐照吗（学校的鼠房没有这方面的器材，而且拿出鼠房的小鼠不能放回去的，比较坑爹，有木有药物可以杀死原有造血细胞替代辐照的）  D5 d2 P& w6 J; `( h: f* M/ O
4，射线的用量不是很懂，半致死量这些是如何确定的？: L8 d% f9 @  ]0 ?4 w
5，一般辐照和移植的时间是如何确定的？* |) p( Y* W2 L6 _# I6 H4 B
6，移植多久后比较合适看效果，是不是 可以直接通过血涂片看GFP细胞的比例就可以了？. u) D  Y' j% f

hyde

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. f( r9 o4 F; i0 I6 y移植后小鼠可以不养在清洁级或者SPF级别的环境中吗？学校的辐照设备在动物房外面，他们规定拿出去的小鼠不能再在动物房饲养。+ ]% A$ I; I3 g% M  k
我想问分离的骨髓细胞比较杂，我说的分选是指要不要用造血干细胞的marker纯化一下再移植还是直接全部移植？
8 l9 ^) H: q0 P7 e/ M6 ?  d. a谢谢。