磷酸钙转染的问题

yiyi8909

近期要做磷酸钙转染，想问下用BES好还是hepes好？转染时是把BES滴加到质粒氯化钙混合液里，边滴边吹打还是将质粒氯化钙混合液滴加到BES中？以及做法的具体原理，哪位高手能讲下？

懵懂干细胞

我是直接买的碧云天的磷酸钙转染试剂盒，就200多块钱吧，按着说明书做的！

yiyi8909

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+ H' t' [7 I5 x我们所有东西都是自己配的，没有试剂盒

huangzhenbo131

我做的时候是用hepes, 效果还不错。转染时是将你的质粒氯化钙混合液滴加到BES中，这样做的目的是让你的质粒氯化钙复合物均匀的分散到转染液中。你可以边滴边吹打。我的做法是将涡旋振荡器vortex调到低档震动，然后拿着转染液管子tube放在上面，边震动变滴加质粒氯化钙复合物。/ ^1 \/ z( A8 a# u: ?/ E' ^

yiyi8909

回复 huangzhenbo131 的帖子! {: @  i8 x- P. _
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学习了，以后可以试试，我们原来是吧BES滴加到氯化钙里，边滴边捶打，下次调整下看看结果如何

听不到

回复 yiyi8909 的帖子, j) t. Z& _; I8 i8 h. `1 S& F% W
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你好，我想问问你调整后结果如何？用Hepes效果好吗？

听不到

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想咨询下你，碧云天的磷酸钙转染试剂盒转染能包病毒吧？包出来的病毒滴度高吗？

懵懂干细胞

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( {$ p  V5 _% f4 C1 L, n5 h+ F: c
我就是用来包装慢病毒

听不到

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0 B9 n& D4 b, k, c9 C
. m% b% X: j; H# \3 ^/ |那你用这个包出来的病毒还用超速离心浓缩吗？

懵懂干细胞

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( ^1 C, ~& ~  ~6 @4 o是的！