磷酸钙转染的问题

yiyi8909

近期要做磷酸钙转染，想问下用BES好还是hepes好？转染时是把BES滴加到质粒氯化钙混合液里，边滴边吹打还是将质粒氯化钙混合液滴加到BES中？以及做法的具体原理，哪位高手能讲下？

懵懂干细胞

我是直接买的碧云天的磷酸钙转染试剂盒，就200多块钱吧，按着说明书做的！

yiyi8909

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% |3 ], U# Z! I6 w. {5 B+ L我们所有东西都是自己配的，没有试剂盒

huangzhenbo131

我做的时候是用hepes, 效果还不错。转染时是将你的质粒氯化钙混合液滴加到BES中，这样做的目的是让你的质粒氯化钙复合物均匀的分散到转染液中。你可以边滴边吹打。我的做法是将涡旋振荡器vortex调到低档震动，然后拿着转染液管子tube放在上面，边震动变滴加质粒氯化钙复合物。+ U  F  y$ r' l6 q! h1 }* i

yiyi8909

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( t3 ?! h- q  U
8 ^  e1 F2 _; w学习了，以后可以试试，我们原来是吧BES滴加到氯化钙里，边滴边捶打，下次调整下看看结果如何

听不到

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+ {! X" @' R  J/ f: W
你好，我想问问你调整后结果如何？用Hepes效果好吗？

听不到

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0 l" k6 p( t$ S* D# H2 d1 m
想咨询下你，碧云天的磷酸钙转染试剂盒转染能包病毒吧？包出来的病毒滴度高吗？

懵懂干细胞

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我就是用来包装慢病毒

听不到

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" {" q. A) |9 ]+ a$ \! e. Z! X8 h& R0 Q3 _7 a+ f8 M
那你用这个包出来的病毒还用超速离心浓缩吗？

懵懂干细胞

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+ V9 Q9 K. D& k是的！