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无血清培养基的选择   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-11-13 13:07 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教高手们,目前大家有使用无血清培养基的么?讨论下哪种比较好?
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沙发
发表于 2014-11-13 14:58 |只看该作者
你实验的目的是什么啊,养干细胞还是普通细胞?养普通细胞,做处理的时候,血清饥饿,大家一般都用无血清培养基啊,很多培养基一开始也不带血清的啊
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藤椅
发表于 2014-11-13 15:21 |只看该作者
借帖子请教一下大家,有没有哪位用过血清替代物的,效果怎么样?是什么牌子的呢?
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板凳
发表于 2014-11-13 16:51 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 水念人倦 的帖子/ Z- t; K9 h6 Z  I( v2 |0 @1 L+ {: P
. i) \  ~8 Q6 d/ h
你是要养UC-MSC用血清替代物吗?我们用过Gibco的,但是效果不理想,还不如直接用 血清来培养。
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报纸
发表于 2014-11-13 17:23 |只看该作者
我们现在大量培养的CHO和293都是用来做瞬时转染的,一部分做成稳定细胞系的也驯化成了无血清培养,之前用的是Gibco的液体装,现在用固体粉末,自己配成液体的,成本大大降低,
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发表于 2014-11-13 20:34 |只看该作者
回复 moluxingke 的帖子
7 P. Q5 b" Y$ s0 E
9 B- R" L7 ~+ i& G楼主是想请教并了解大家在实验中使用无血清培养基的种类的选择情况。无血清培养基(一般使用血清替代物)仍含有较多的动物蛋白,如胰岛素,转铁蛋白、牛血清白蛋白等。所以实验室考虑使用无蛋白培养基和限定化学成分培养基,并对其培养不同干细胞的效果进行验证。0 ?4 m. {; q: q2 t* }
无蛋白培养基(protein free midium,PFM):即不含有动物蛋白的培养基,一般添加了植物水解物以替代动物激素、生长因子的作用。
* B2 I  T( U4 ]: m% f( i4 z+ h2 l# Q限定化学成分培养基(chemical defined medium,CDM):是指培养基中的素有成分都是明确的,它同样不含有动物蛋白,同样也不是添加了植物水解物,而是使用了一些已知结构与功能的小分子化合物,如短肽、植物激素等。这种培养基更有利于分析细胞的分泌产物。目前,实验室正在试用这两种培养基,所以希望可以了解到其他实验室对这两种培养基的使用情况和品牌的选择。
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发表于 2014-11-13 20:45 |只看该作者
回复 dahui 的帖子. q7 N0 K. F# t$ B! {8 L

* [# Y' S$ p# D你好,Gibco的液体装和固体粉末,我们实验室都使用过,液体装还好,固体粉末配制比较麻烦,而且取出粉末的过程不是很好操作,对实验室环境也不好,对质控测尘埃粒子也有影响。可以说一下你们实验室的配置流程吗,对粉末如何处理的。
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发表于 2014-11-13 20:54 |只看该作者
回复 ytumuyangren 的帖子
/ b% k( m7 |+ U* p, {! O( T; j9 u# J5 s
用含血清的培养基培养效果的确是很好,但是纯化过程就比较复杂,也很难达到质量标准。培养出来的干细胞做药物筛选是没大问题,但是移植到动物模型身上就不太好了,更不用说下一步临床课题研究了。
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发表于 2014-11-13 21:06 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子
% R$ W4 R) Y/ `9 I% N% `0 _; e6 [1 }6 K# g  l' }
现在有卖无血清培养体系的培养液,这种体系的培养液用的是人工合成的各种因子,培养干细胞比较理想,但是细胞增殖速度不如有血清的培养体系,但是细胞的干性维持的较好。这种体系用的添加因子和血清替代物还是有区别的。
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发表于 2014-11-14 08:29 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子
" X! g' e- p& ^" y" [/ w. k+ S1 Z
- Y+ N# N* Z: C- g: _1 Y, O/ M* n楼主,我们是工业生产,全部都是在十万级车间内操作的,大概流程无非就是称重,溶解,0.22过滤,分装,打标签。虽然具体的操作也没有什么特别注意的地方,但是涉及到公司的SOP,所以有点不方便。
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