ES细胞形成的拟胚体EB免疫荧光染色方法求助

最大的疯子

大家好，我现在需要对胚胎干细胞悬浮培养形成的拟胚体EB直接进行免疫荧光染色，总是染不出来，希望各位有人做过的能够提供帮助！谢谢！
, p9 q* o6 |4 L3 Y+ o我的染色过程为4%PFA固定30min，. V/ ]" G  M9 ]+ U
PBS/0.5%triton x-100（PBT)洗三次，每次10min。
. O6 s9 g7 f# ~6 C5%BSA/PBT 封闭2h! Z" i& X, D& v: i  r
5%BSA/PBT稀释的一抗4度过夜
% x7 e2 `& U6 E* i# ?PBS/0.5%triton x-100（PBT)洗三次，每次10min
9 ~3 I% A( @& v# M7 b! z/ b5%BSA/PBT稀释的二抗4度过夜! O/ W3 @! A8 K/ Q: S9 g
PBS/0.5%triton x-100（PBT)洗三次，每次10min, M4 N3 E3 |/ ^; [
荧光照相。7 x+ v9 X  u. h( t  C+ _
' q8 |/ @0 W1 C4 J: q& t. P" f

最大的疯子

回复 千细胞 的帖子
  a# R1 k8 ]  |+ F/ P$ v
& e0 c5 x9 m/ [2 J7 [& H# j% o/ W+ O谢谢，我是要染gata6