继续请教SHSY5Y这个细胞系的培养问题

baby00000003

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' H2 r( K/ R: i, ^1 v8 i, K- j问题：SHSY5Y这个细胞系使用HDMEM进行无血清培养就会出现无数的小黑点么？1 C# q! T) k0 h4 @

5 N- E8 z/ A3 [最近在做这个细胞系的分化诱导，使用的是无血清体系，然后出现了如下图的状态% ~9 K8 w% \. F) |& Y/ [
下图是使用RA诱导过3d的* A/ ~% Z, ~0 `8 D

2015-8-3 11:32 上传

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: A( i: D+ l' f. ~0 H! N+ |怀疑过是污染，然后一个一个原因的排除，而且专门做过菌培养都是阴性9 J4 t% f' Q2 ]( I
下图是无血清不加RA的% z0 s: @( d1 f

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+ g" a1 a+ W$ u" S8 o9 J下面这个是换了另外一种无血清培养基培养的，没有那个点点
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再来一张把HDMEM和另外一种培养基混合在一起培养的
, w% A/ @: `. m, P8 w3 R

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4 s+ f& x! f7 i4 U" o# l  O
总之，结论是，只要是含有一定比例的HDMEM的无血清培养基，就会出现那种小小的点点0 H9 |4 ?& t/ {6 c, U
这个细胞平时是用HDMEM＋10%FBS传代的，各方面都很正常
( W' O/ w0 K$ ~" S0 R' z2 G
( p: z" U# ~/ D5 k可有做过这个细胞诱导的前辈分享经验呢？
4 l, _  t0 r" S3 M0 \! J; Y先谢过～

baby00000003

- e' U6 h+ x% D+ |

3 T+ `( U* U+ I$ J$ y, V回复 ccwei0615 的帖子9 n$ L( x$ x" O1 ]

, {" m9 n% I4 O0 s  D' ahave you done SHSY5Y--->DAergic neuron induction?
% P0 W8 @0 S# }' Z9 `: vwould you please share your formulation of ECM and induction media?0 b: V, A# ^) ^/ t% `8 R
i suggested laminin as ECM + HDMEM+0.25XB27 but leaders kept ignoring my idea