继续请教SHSY5Y这个细胞系的培养问题

baby00000003

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3 U9 A' n- d+ b
问题：SHSY5Y这个细胞系使用HDMEM进行无血清培养就会出现无数的小黑点么？
; m9 j& B1 q6 B  H0 m! q8 K" {! V  s4 j, P
最近在做这个细胞系的分化诱导，使用的是无血清体系，然后出现了如下图的状态. X4 a0 k6 e8 S/ J. A8 a/ b
下图是使用RA诱导过3d的
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2015-8-3 11:32 上传

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! V; C, L+ D' ^% P5 M
怀疑过是污染，然后一个一个原因的排除，而且专门做过菌培养都是阴性* i  Z# M% ?* w" w
下图是无血清不加RA的
1 S" R: R9 l7 h, A; p

2015-8-3 11:32 上传

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3 e  j  g) l5 R/ u2 |( m$ Y+ C  W下面这个是换了另外一种无血清培养基培养的，没有那个点点( h/ b1 X4 C6 f( S' G. J% I9 g" r

2015-8-3 11:32 上传

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4 ~. t6 f# c# {; E+ @再来一张把HDMEM和另外一种培养基混合在一起培养的8 n. z6 ]7 K4 Y' L) Q

2015-8-3 11:32 上传

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总之，结论是，只要是含有一定比例的HDMEM的无血清培养基，就会出现那种小小的点点
6 v2 V4 C* d" E) l这个细胞平时是用HDMEM＋10%FBS传代的，各方面都很正常+ B7 v: Q8 V0 M) H6 p; P3 z

1 e' T& q9 h6 i) m0 B) u可有做过这个细胞诱导的前辈分享经验呢？, g2 c2 A, c) s, P; W* c
先谢过～

ccwei0615

very interesting. even i do have experience with shsy5y before but i never suffered with this problem. would like to know others' comment.

baby00000003

& @6 B- A, J& y6 X3 W3 _2 }

/ c/ A. C# `, a* w) Q, x! h% C$ i0 B回复 ccwei0615 的帖子0 @+ j, c' K! P0 `# f5 U

! g5 Z$ ?) Y0 M" k) L  ~( ?have you done SHSY5Y--->DAergic neuron induction?
. T3 t5 d6 B' d2 p, zwould you please share your formulation of ECM and induction media?1 t6 ~2 d) K& G" H
i suggested laminin as ECM + HDMEM+0.25XB27 but leaders kept ignoring my idea