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小鼠ESC基因敲出挑选阳性克隆到96孔板中,胰酶怎么使用? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-12-7 17:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
小鼠ESC基因敲出挑选阳性克隆到96孔板
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沙发
发表于 2015-12-7 17:19 |只看该作者
之前96孔板中加入20微升的胰酶,挑满96孔板后再加培养液,终止胰酶,后来挑出的克隆就不在分裂生长了,是不是胰酶加的时间太长了

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藤椅
发表于 2015-12-30 10:10 |只看该作者
胰酶消化大概也就37度 30s,估计和你敲除的基因也会有影响...........
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板凳
发表于 2015-12-30 10:16 |只看该作者
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胰酶都需要血清才能终止,培养基里面可以加点血清,或者你用其他的酶,trypLE或者acctuse都可以。消化3分钟都没关系,时间短了克隆不能成为单细胞也不好传代的。
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