组织块贴壁法培养MSC遇到的一些问题，前来求助

正义的花生

1.组织块在T175培养瓶中贴好后第一次加液加多少比较合适？& F2 S6 ^5 C  Y# W8 g) {/ h
用的是第一次加液后过7天再换液的方法，之前做的时候加多了，本来贴的很紧的，结果过了两天就飘起来一大半。$ i+ t! G7 b, e3 y  H

: k/ i6 _9 ]' P( f2.如果用的10cm的培养皿呢第一次加多少呢？还有就是听说用培养皿容易被污染，有什么要特别注意的地方？
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4 I* a+ S5 V' W2 i) m( x  A% M3.剥下来的组织块是用生理盐水冲洗下在放进瓶里贴壁还是直接贴壁的好？
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4.我现在用的是***培养基和***血清替代品，换液的时候血清替代品也要按比例换新的吗？" b+ Y. ?/ g, E2 K
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干细胞老手

培养基质量不行 我用过这个牌子的 非常不好用

正义的花生

6 y. D3 S9 X3 ?5 k" N

- Y' v5 a$ P, j什么情况 发产品的牌子会被河蟹吗

鸵鸵

按照正规的无菌操作的话，培养皿是不会容易污染的 ，10cm培养皿通常加8-10ml左右的液体即可，剥取的组织块最好直接贴，不用生理盐水洗涤，除非有大量的血红细胞才选择洗涤一下，另外换液时血清替代品要按比例进行添加; K8 C  ~; O6 W6 D9 F

Tracy-Cui

污染的问题应该和培养所用的器皿没有关系吧！虽然没有培养过MSC，但经常用培养皿培养其他贴壁细胞。培养皿培养时操作上需要特别小心，例如打开培养皿盖的方式；不要让手臂过培养皿上部；换液和其他操作时避免交叉污染等。我也是来学习的~

沙漠狐o0

1.T175加10mL培养基即可。
/ h9 k! L) x* w5 S) o: B% i% u2.不建议用培养皿。* I/ a5 O, Q. N" K: {$ F
3.最好用含双抗的生理盐水清洗一次。
6 O. p! W% e0 I4.神马，被和谐了。。。比例不需要换。

木头1102

我一般是将剥下的胶先用含双抗的生理盐水洗一下，剪碎后加到培养瓶里，37度培养箱放置一个小时后再加入培养液，我一般T175的培养瓶加16-18ml，37度，5%二氧化碳培养箱中培养，第7天换液