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想问下大家,ips传代过程中,是未分化的先消化下来,还是分化的下消化下来。 [复制链接]

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楼主
发表于 2015-12-28 10:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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之前看论坛上说ips传代用4型胶原酶消化,一般大部分克隆下来(50min~60min)就可以了,下不来的克隆多数是有分化倾向的,应与去除。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

沙发
发表于 2015-12-28 12:48 |只看该作者
回复 2374691002 的帖子
5 _1 ^9 K0 @$ a
2 b6 M1 O6 o" b比较温和的酶消化,如胶原酶,分化的细胞是后消化下来,分化的细胞一般比干细胞贴壁更紧,个人经验,一般胶原酶消化30min-40min,克隆都会掉下来。我现在用dispase酶,可以快速的将干细胞克隆消化下来。
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藤椅
发表于 2015-12-28 15:47 |只看该作者
未分化的先消化下来~
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板凳
发表于 2015-12-28 17:21 |只看该作者
回复 watchen198891 的帖子: v" E5 ~; q, M' J

7 n- L- ^3 ]" D2 p! }你好啊,我想问一下dispase酶消化多久能完全消化下来,我37度消化6min,只是边缘脱离了matrigel,最后我是刮下来的。
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报纸
发表于 2015-12-28 18:35 |只看该作者
回复 2374691002 的帖子$ a) A9 F: U: O$ `8 x$ |( J* m
7 t, Q# [# w" }1 D2 a8 d& J) C
我是饲养层养的,一般37度3-5min就能让克隆卷边,然后轻微吹打一下就掉下来。
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地板
发表于 2015-12-30 17:48 |只看该作者
看文献是未分化的是先下来,有分化倾向的是还挂在皿上。
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