脐带干细胞培养用那个类型胶原酶好些？

fjq729587158

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. ]- `: w7 N% f- i' U6 v脐带干细胞培养用那个类型胶原酶好些？

林辉

I型胶原酶

tingting2113

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有用1型胶原酶的，但是我们平时都用组织贴块的方式提。

jenny114402

IV也挺好用的7 V) {& I, X1 t) Z# E2 q

fjq729587158

我用I型胶原酶消化1h、1.5h、2h，细胞量不多，并且培养第三天细胞都死了；此外用II型胶原酶消化1h、1.5h、2h、2.5h，细胞量比I型胶原酶要多，但同样培养第三天细胞都不贴壁，大部分都死了，怎么回事？

细胞海洋

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木头1102

我用0.1%的I型胶原酶，组织量与酶1：1消化4h，10倍PBS稀释，800G左右离心10min，收集沉淀，400G左右5min，用无血清培养液培养。三天左右就有细胞贴壁，但很少，一般第6天半量换液，10天左右能传代。

yanglixia1984

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# C8 \6 K4 s; |4 m7 w你这消化时间太长了吧，太太长了

shamoye

以前用0.1%的I型胶原酶消化时间也是4到6小时的，不过消化法杂细胞比较多，但是长起来之后就还好啦，没发现存在死亡的现象

ytumuyangren

用I型胶原酶配合胰蛋白酶就可以了，0.1%I型胶原酶过夜消化，后用0.05%的胰酶继续消化，待液体澄清后离心收集沉淀，冲洗2-3次就可以了，不过用酶消化后的脐带间充质干细胞需要有纤连蛋白等蛋白利于细胞的贴壁，当然酶消化后的细胞贴壁效果不好。