请教有关活细胞染色和分辨

baby00000003

请教各位老师，可有一种染色方法，可以让活细胞和死细胞之间产生明显的颜色差异么？（苔盼蓝不算）
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" P, T- h( q* {5 D实验目的是“连续观察某一培养体系中细胞群体的生存状况”，
3 K& P6 }/ o$ S! ]" ?1 z* }* K, s即是说，不是染一次就完事儿，而是随着染色（一次性染色或者将染料添加至培养基都可以），细胞的生存状态可以随时反复观察。* e- r9 J' t6 d& x4 e" K0 F
所以trypan blue 或者PI annexin-FITC之类的一次性方法就行不通了4 ]5 N7 `- s3 i% Q
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比如，使用EGFP基因转染组成型表达，活细胞即表达EGFP，可见绿色（我还不清楚这种蛋白完全降解失色需要多久）
1 S5 S. v! J: ^- v) q0 _或者有某种可以指示线粒体活性的染料，只要细胞活着，线粒体就有荧光之类的
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各位老师有做过类似实验的经验可以分享么？- F, z( u1 v. v; d- m2 }  s/ ~
多谢啦！

ytumuyangren

我可以理解为你只观察细胞的状态么？那样你就可以用慢病毒包装GFP基因即可，转染至需要观察的细胞，荧光显微镜下就可以观察了，只要细胞活着GFP就会一直表达。

baby00000003

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那个办法麻烦呢～又浪费钱～2 L' y- `6 L  G! R
我的理想是能在培养基里加某个试剂或者预处理下细胞，简单又便宜的  K: X  c/ C3 I( L5 V# E, @  q
只要它活着，就能一直发出可观察的信号，荧光、特殊颜色神马的～

ytumuyangren

回复 baby00000003 的帖子% }- C6 x, m0 f0 @, _
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这个好像不好办到，目前了解没看到有这样的对细胞无毒无害还能发出信号的试剂。