CAR-T细胞转染请教

六弦七品

MOI低了转不进去，高了细胞又挂，大神们是如何解决这个问题的？

拉二胡的拉尔夫

1.逆转录病毒:优点：转导效率高。缺点：有引起插入致瘤的风险，不能感染非分裂细胞，病毒滴度低2 P& N1 [1 w4 Z( y4 X  u' `
2.慢病毒：优点：转导效率高，可转染分裂细胞和非分裂细胞，长期稳定的基因表达。缺点：成本高1 l8 d5 B( L4 h1 w' l
3. RNA电穿孔：缺点：瞬时表达（<1周），需反复注射

riverdtang

慢病毒，超离浓缩到8次方以上滴度，加polybrene，T细胞分离24-28h转，有50%转染率

ET生物人

回复 riverdtang 的帖子/ W5 e% o$ l/ F/ h1 D

" C  t( v) I6 [9 _/ H1 Z2 fT细胞分离24-28h转   请问 这是什么意思？？

riverdtang

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) I, y8 Z/ ^) L* [0 d, V  I. ~1 N+ r6 u5 J2 [' S
分离后48小时转，效率高些

ET生物人

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* P) }3 A' u% W5 ?. M
# g# m, W* P/ w你是用什么培养基的？？我们用了好多方法，发现转染效率很不稳定 不知道是哪里出问题

riverdtang

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: Z6 w3 U8 r! n5 }6 C: f- @8 J$ \" U( v
takara，美天旎，lonza等养T细胞的培养基都可以，感觉培养基对转染率并没有太大影响

biluolinyu

转染不加血浆和抗生素算不算？

ET生物人

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8 [) ]5 E# W& s: I! x# d# z5 K4 D" p" l% y9 C4 f" ?0 L
那你觉得感染率是跟什么有影响？

lgfffancy

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0 g3 M9 [3 t# B& R# J+ n0 @& X/ [' F) C, z
transfection的时候最好不要加抗生素，提高转染效率