CAR-T细胞技术

林辉

1989年首次提出和设计<!--[if !supportLists]-->•
2 S  P- W" c# }& S' _<!--[endif]-->, G- q1 z1 v1 m
通过将识别肿瘤相关抗原(tumor associated antigen,TAA)的scFv和胞内信号域“免疫受体酪氨酸活化基序(immunoreceptor tyrosine-based activation motifs, ITAM, 通常为CD3ζ或FcεRIγ)”在体外进行基因重组, 生成重组质粒, 再在体外通过转染技术转染到患者的T细胞, 使患者T细胞表达肿瘤抗原受体,转染后经过纯化和大规模扩增后的T细胞, 称之为嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)。4 P/ q& C5 |  u3 c6 G
- f2 Q6 v9 q$ _' _. X8 r
<!--[if !supportLists]-->•
8 ?9 ]5 F* s$ g5 d$ X<!--[endif]-->CAR-T细胞在体内、外都具有对特定肿瘤抗原高度亲和性及对抗原负载细胞高效杀伤特性。CAR-T细胞技术在白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、脑胶质瘤等恶性肿瘤治疗中均显示出良好的抗肿瘤效应。
, S3 @3 c5 c4 z6 I6 f6 }% ?& `. E. W5 u' S1 _! t

CAR 结构示意图

4 e) C5 ^% G- b1 j' {4 ^

CAR-T细胞肿瘤治疗流程

CAR-T基因转导方法

<!--[if !supportLists]-->&Oslash;
1 M" P3 S, r) N( i6 N<!--[endif]-->逆转录病毒

8 W8 G5 Z+ W6 K  v( `优点：转导效率高

' E9 B: `- f% _1 X4 d
缺点：有引起插入致瘤的风险，不能感染非分裂细胞，病毒滴度低

<!--[if !supportLists]-->&Oslash;
% V8 O; W! f3 |# y# i+ t9 Q# V. D! Z<!--[endif]-->慢病毒

  u3 v. Q* U( z- O$ x1 v" t优点：转导效率高，可转染分裂细胞和非分裂细胞，长期稳定的基因表达

: [6 T$ d! w0 T0 c; n& g缺点：成本高

<!--[if !supportLists]-->&Oslash;
  K2 l% z$ y8 K- ^- C<!--[endif]-->RNA电穿孔

缺点：瞬时表达（<1周），需反复注射

, Z- N9 B" F! X4 n; s; ~/ s

前期的临床试验多采用逆转录病毒的方法，目前随着慢病毒的安全性越来越高，在临床应用方面越来越偏向于慢病毒。