脐带间充质干细胞培养讨论

田甜

1.脐带剪碎后不需要洗，但剪碎前是需要多次漂洗：脐带减至1.5cm长度，漂洗掉血管内残留血液，脐带表面残留血污；可以不用去掉羊膜和血管，直接去血污后剪碎即可，影响不大。0 q2 a* [! @" v8 ?' r7 g
2.并不是要求每个视野或者说组织块会长出细胞，一般有4-5个大的克隆团长出，就传代吧。如果想着让每个视野都有细胞，那最先长出来的克隆团就会衰老，传代后细胞状态就会一直差下去。一般11天-15天就该传代了（10天前不要总是看细胞，换个液就放回去，这样细胞才能安静的长好）- r9 a# k1 j8 o+ Z8 C
3.组织块贴壁法明显优于消化法。
& j" I$ f$ z) H9 _' e1 k) R6 J4.一般研究，血清培养基培养即可（GIBCO的血清，但血清批次间有差异，运气好的话，会碰到特别适合养间充质干细胞的批次，这个时候你可以追加购买同一批次的FBS，留着备用，反正血清有效期是5年或更久，碰到适合的血清很难）。特殊要求，可选用无血清培养基，每瓶T75得到的细胞比较多，稳定传代的概率大一些。我看这个帖子里有回复无血清培养基的，选的挺好的，我就不说了。
6 t9 n, k1 B/ b; g为了赚威望，说的较多，希望有用。