脐带间充质干细胞培养讨论

pauldong

GIBCO的最好，但是最贵，STEMCELL表现不俗，LONZA性价比高，我比较了解的就是这几款

444352110@qq

哦！你说的是血清吗？

444352110@qq

我培养出来了，但是看形态有点怪，不太像间充质干细胞，这个会是什么原因！

cruilife__wen

你好！4 F) b1 U: @0 }+ A) F5 n) t
1、一般我们都会清洗未剪碎前的组织，因为清洗的目的是表面消毒，这样做剪碎后的黏液相对多一些；而剪碎后清洗我没有做过，对晾干处理的时间会较长。  G2 S5 i( J/ o0 `+ x( k3 M0 e3 Z. d
2、组织贴壁后爬出效果可能跟样本质量，大小，厚度，形状，等因素都有关，所以未必每个视野都有。当然我们也遇到过每个视野都有爬出的。+ L' P, O6 q9 k0 T) ?; u
3、组织贴壁较常规，因为操作相对简单，保持操作一致性。而消化法较少用到，因为消化时间长，而且接触面不充分等问题尤其突出，而且消化出来的细胞质量难以保证。
9 P, ^% o) K# |, V: N5 @4、我用是DMEM/F12+FBS，感觉效果不错。9 n! x* J, W: P) z7 g+ f# j2 R% D$ d' e

' u& J6 k% A5 r; c+ ?6 j/ {6 mQ1：有没有对比过组织剪碎后清洗与不清洗的贴壁效果有多大的差异？

meredith603

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9 w1 c4 m! g& X/ _2 E$ i3 @/ s9 s4 y. {3 d  q! L" c
上图。有图有真相。

444352110@qq

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" F8 D- @. V1 X, \' U! ~* g
6 x5 l0 W$ H& w! ?你好，像你们晾干之后处理方法，可以说的具体点吗？我做出来了就是效果不是很好！只有少数的组织贴壁，长出细胞来。

cruilife__wen

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' G6 k6 f9 f) h$ m3 J* h7 O7 ^2 P
0 `, s7 ~& ~( H. L; T  S其实晾干就是让组织块放置于培养平面，让组织表面上的液体蒸发，因为组织上有较多黏度较大的液体，所以比较快干，晾干就是为了固定组织，让它在更稳定的环境下爬出，以及形成生长晕、形成细胞集落。一般靠经验目测组织的晾干程度，经验值40min左右。等它干了就可以沿壁缓慢加培养基，放置CO2培养箱里培养。
! L% C2 p2 d; c. F( z" i% Z而贴壁效果有很多影响因素，处理时的操作、组织的质量、培养基成分等。其中也有很多我不了解的东西，我也在摸索中。

why77yhw

脐带在去除羊膜和血管后，也就是已经剥离出华通氏胶，剪碎的华通氏胶不必再清洗！因为在剥离之前已经清洗消毒过了，没有重复的必要

Diane0321

首先，组织碎片应该清洗一下的；! d. i: e, n3 b6 ^5 l
其次，个人感觉组织贴壁法更方便些，我们用的培养基是10%FBS+DF12+bFGF，感觉细胞长得还不错

444352110@qq

谢谢各位大侠指教