间充质干细胞培养是否需要加抗生素

saliai2016

目前培养的原代脂肪或脐带间充质干细胞有的实验室是要加双抗的，而有些实验室却不添加双抗，这是怎么回事，添加双抗会对细胞表型产生影响吗？不添加双抗的实验室其无菌级别是不是要达到一定的标准？再就是样本清洗过程中的清洗液应不应该加双抗？关于双抗的添加有无一个界定或者标准？还请大虾不吝赐教！在此谢过！

醉心科研

你是做科研吗？原则上任何细胞培养都不应该加抗生素，因为容易掩盖染菌问题。不加抗生素，染了就是染了，及早发现问题及早处理。$ ]& w+ Q; }+ M! x8 Q- u1 g0 E% o
至于抗生素会影响表型？我倒没听说过。
# G* b, l- ^( J8 b. H如果仅为科研实验，原代培养取材如果不能保证无菌环境，可以初期加抗生素。! f0 l4 K2 x& x1 a, q2 M) k

* o3 X  a* {: |" R9 p/ H如果是生产或临床，那抗生素就是决不允许添加的。

zhangjieyctc

回复 saliai2016 的帖子, h6 N- q) ~! c& d6 q+ A

" o: m4 U1 t) ?" j- H# r/ _加不加抗生素没有什么绝对的，主要看你承受风险的能力，没有什么标准，培养细胞添加双抗是不会影响细胞表型的，同时也不会影响细胞状态（有些人认为加双抗会影响细胞增殖能力）个人做过对比实验，没影响的。如果培养过程中不想添加抗生素的话，可以在分离前用含有抗生素的清洗液适当冲洗、浸泡一下样本，可适当减少污染的风险。

deshenglll

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用组织块法培养的话最好别加。要不细胞比较难养

meredith603

如果你能不加双抗的情况下养好细胞，不污染，就最好不过了。百级超净台就行了，也没什么特别要求。2 S+ @% E( q) P" N: o# l' x7 M
如果是新手，对自己的无菌操作很没有把握，还是加吧。其实双抗很多时候就是个心理安慰，无菌操作不过关，加了也白加。: U/ X5 D7 {3 Q9 l
文章里，写加了双抗或没加或加的其他抗生素也不会被认为影响你的实验结果。

如歌岁月lian

脐带一般不加双抗，有污染再加，脂肪因为采集过程就不是无菌的，那肯定是有细菌的，那就要加双抗

1276916287

细胞培养加不加双抗跟你的实验有关，如果是原代细胞，在处理组织块的时候可以用含双抗的生理盐水或PBS清洗一下，避免取材过程中可能存在的污染，但在细胞的培养过程中，我觉得还是不加的好，有时候轻微的污染在双抗环境中是看不出来的，去掉双抗就会爆发，对应用于临床的细胞是绝对不能加双抗的，供参考

smile微微笑笑

培养细胞过程中，一般都认为应该尽量减少这种外源因子的添加，其实加了双抗，该污染还是污染，更应该注意无菌操作，在原代培养时，我一般会用在洗液中加少量庆大霉素清洗几遍组织，培养过程中可以不加~

yingfeixiang

细胞培养加不加双抗跟你的实验有关，可加可不加，样本储运过程中可以添加，正式制备样本组织块多清洗几遍一般都不会污染，主要还是无菌操作，在细胞的培养过程中，还是不加的好，有时候轻微的污染在双抗环境中是看不出来的，去掉双抗就会爆发，如果发现污染可以用双抗抢救一下，对应用于临床的细胞是绝对不能加双抗的，所以所加不加在你，只要严格无菌操作，一般都是没问题的，供参考

why77yhw

对于脂肪组织来说，关键看采集，根据个人经验，手术获得的脂肪块多带菌，而动力吸脂得到的脂肪组织多不带菌。也就是说，如果采集来源是可靠无菌的，那么无论是清洗、还是培养环节中只要主要规范操作就不必添加双抗；相反，若来源就已经染菌，那么清洗的时候可以适当调高双抗浓度，将双抗清洗掉后进行培养，培养过程中不必加双抗。, O9 R8 `2 I5 w( B" c0 n. \0 E6 h
对于脐带来讲，采集后分立前都要清洗，第一遍可以用一定的消毒液清洗（具体采用什么消毒液依据各个实验室自己的规定），经过消毒和多次清洗的脐带组织，放心的分离培养，注意规范操作不会有问题的。