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请问大家,我们在诱导iPS时,去掉滋养层细胞,把ips吹打成单细胞悬液后铺板后 [复制链接]

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楼主
发表于 2016-4-27 19:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2016-4-27 19:49 编辑
" w! W1 ?, ^3 X! O2 z
2 x5 C: S; [! \" y请问大家,我们在诱导iPS时,去掉滋养层细胞,把ips吹打成单细胞悬液后铺板后,细胞大量死亡,如何让单个ips贴壁呢?谢谢
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沙发
发表于 2016-4-28 08:24 |只看该作者
用什么铺板的?哪种培养基呢?一定要用单细胞是吗?知道这些别人才方便更好的回答你:P
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藤椅
发表于 2016-4-28 08:47 |只看该作者
一般如果Human iPS分化或传代时,如果消化为单个细胞,想提高细胞的存活效率,可以添加 Y27362
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板凳
发表于 2016-4-28 19:46 |只看该作者
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* C8 h9 n  j$ G  R" p. |' |6 _* H/ J0 e5 r
我们用的是vitronectin铺板,细胞如果比较碎,会加Rock inhibitor
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报纸
发表于 2016-5-6 11:26 |只看该作者
可以试试加视黄醇进行驯化,但是既然是驯化,就得循序渐进,逐渐减少feeder的量,而不能直接去掉feeder。
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地板
发表于 2016-5-16 13:46 |只看该作者
不要吹打成单细胞,最好是多个细胞联在一起,容易活。单细胞需要用特殊的基质胶才行,matrrix,matrigel,VTN都不适合。
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