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楼主: 刘小明
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请教大家有关冻存液的事情   [复制链接]

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发表于 2016-8-27 15:10 |只看该作者
最少加过200ul,最多加过1ml,冻存密度的话最大时一个T25干细胞(大约600w)冻200ul,密度小的时候半个6孔板孔干细胞(大约100w)冻1mL。冻存液配置比例都是hESM:FBS:DMSO=7:2:1.
/ a( o8 w3 i5 |- \2 G1 Z, b& m个人感觉冻存以后复苏结果好不好与这些关系不大,关键在细胞状态,细胞状态好冻很密复苏效果 也非常好,细胞不行,全部加FBS和DMSO也没用。
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发表于 2016-9-2 08:50 |只看该作者
我们冻存的时候没有用DMSO配制冻存液,因为DMSO对细胞是有损伤的。我们是用培养基:小牛血清为1:9,细胞直接用培养基混成细胞悬液。这样复苏的时候就不影响细胞活率。且复苏时不用离去上清,可以直接加培养基入瓶培养。
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发表于 2016-9-6 13:44 |只看该作者
DMSO:FBS=1:9,配好之后,直接用冻存液重悬细胞冻存即可
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