干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: yangyaping
go

有什么方法能让组织块贴壁贴的牢固   [复制链接]

Rank: 2

积分
295 
威望
295  
包包
105  

金话筒 优秀会员

11
发表于 2016-9-14 09:09 |只看该作者
尽量避免组织块有过多的外来水,比如多次洗涤,有大量的PBS或者生理盐水,+ f+ C, V- I3 B8 _4 J
组织块要处理的小,不论是剪还是用组织处理器,挑小块的做贴壁,最大也别超过3-4个立方毫米,
9 M% ~$ y0 U6 r6 f5 P* s6 V( m根据组织块的湿润程度,判断一下静止的时间,一般怎么也要1小时以上,但也不要太久,时间久了就干了,贴得牢但是不会有细胞,* d9 J+ |* U1 [3 X/ |  l
加培养基的时候稍加一点,刚刚没过组织块就行,之后3到5天再补,
' a1 V0 _6 ^3 M3 [5 V0 C组织尽量少接触双抗,抗生素会让细胞不愿意长,真的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
287 
威望
287  
包包
748  

优秀会员

12
发表于 2016-9-14 09:22 |只看该作者
可以先用猪明胶或鼠尾胶原铺板,然后加入组织块,有助于组织块贴壁,具体使用浓度可参看产品说明书或结合实际情况,效果还不错。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
96 
威望
96  
包包
312  
13
发表于 2016-9-20 10:10 |只看该作者
一般都是刚分离时候少加培养基,也可以向前面朋友说的先干贴再加培养基,个人感觉少加培养基就可以  ,换两次液基本上就都贴上了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
0  
包包
16  
14
发表于 2016-11-29 16:17 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
学习

Rank: 2

积分
102 
威望
102  
包包
313  
15
发表于 2016-11-29 17:01 |只看该作者
回复 yangyaping 的帖子, n( k2 i. c- S. X/ B6 B$ M
! E; l* T6 t7 v! s' O1 a
详细具体的讲最好用,25平方厘米的flask,组织块用大圆刀片,剁的越碎越好,让后先让组织块被培养基浸湿,然后用玻璃吸管将组织贴附在瓶底,然后将瓶子树立放10分钟左右,让组织块贴牢,然后在瓶子竖立的情况下,加入4ml培养基,沿没有组织的一面,加入到竖立状态下的瓶底,然后非常缓慢的放到flask,让培养及慢慢没过组织块,前3天最好都别去碰它。过三天再看看有没有细胞爬出来。哎呀累死我了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
327 
威望
327  
包包
1472  

优秀会员

16
发表于 2016-12-1 13:22 |只看该作者
尽量不要使劲摇晃培养皿,还有就是在消化加胰酶,PBS的时候不要使劲吹打,要尽量打在皿边缘,还有就是在换液的时候要轻一点避免吹掉组织块
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
9  
包包
81  
17
发表于 2016-12-1 15:54 |只看该作者
培养基最好采用少量多次的方式加入,加入新的培养基之前可以把旧的吸出来~~~
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-11-1 06:52

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.