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[请教] HUCMSC成脂、成骨、成软骨诱导培养基的详细配方!!! [复制链接]

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楼主
发表于 2016-9-8 09:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 细胞海洋 于 2016-9-9 13:43 编辑 $ z+ j7 q; q: N; {+ S) b
  d' A3 Q. F) k1 F, Y* [4 s
HUCMSC成脂、成骨、成软骨诱导培养基的详细配方!!!
5 L" x2 x6 O0 Q6 F请见笑,我是新手!! !" J4 g2 F# f: H0 ^- Y! P* z
尤其是成软骨培养基中的ITS全称是什么?1 p+ @" N: A) i. \( U( A
谢谢大家!
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沙发
发表于 2016-9-8 09:52 |只看该作者
回复 15891778445 的帖子: D( b1 \& E& u: M! G

7 O/ I* I. o$ }3 S5 o胰岛素-转铁蛋白-硒
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藤椅
发表于 2016-9-8 13:31 |只看该作者
一、加双抗
8 K2 r, D0 _( ?8 h( y1、成脂分化诱导液(含体积分数10% 胎牛血清,10 mg/L胰岛素,1 μmol/L地塞米松,0.5 mmol/L 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤,100 μmol/L 吲哚美辛,100 mg /L青霉素,100 U/mL链霉素)每三四天换1次液,连续诱导14d: Y  P7 W9 K( @) z8 h7 D
2、成骨分化诱导液(含体积分数10%胎牛血清,100 nmol/L地塞米松;10 mmol/L β-甘油磷酸钠;0.2 mmol/L抗坏血酸,100 mg/L青霉素,100 U/mL链霉素)。每三四天换1次液,连续诱导三四周
4 r$ A& }, |  a. ?, M二、不加双抗) |8 K# f: _- I0 @/ g8 E  m
1、成骨诱导分化培养液( 用高糖DMEM 配置的完全培养基、0.1μmol /L 地塞米松、50μmol /L 抗坏血酸、10mmol /L β - 磷酸甘油)& X; h# Z, n2 q2 H# U
2、成脂诱导分化培养液( 用高糖DMEM 配置的完全培养基: 1μmol /L 地塞米松、200μmol /L 吲哚美辛、10μg /ml 胰岛素、异丁基甲基黄嘌呤) ,每4 天半量换液,连续诱导3-4 周
3 N3 d3 h+ a; B& ]3、成软骨诱导分化培养液DMEM无血清培养基,诱导剂包含:地塞米松0.1μmol/L、牛血清白蛋白(1.25 mg/m1)、维生素C(37.5μg/m1)、丙酮酸钠(1 mmol/L)、TGF—B(1Ong/ml)、β-FGF(1ng/m1)、ITS(6.25 pg/ml牛胰岛素、6.25μg/ml转铁蛋白3 K  \* f% t& i& A0 T) E* u
若只做科研加双抗安全一点
5 A( {' v3 a* s) o9 ]
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板凳
发表于 2016-9-8 15:32 |只看该作者
回复 UlissesJR 的帖子
1 b& M; n5 ~. D! b
- @) o" }  [. F# L我想问一下,这都是体积多少的配方?
- t/ W4 v, Z2 c; B. Q还要我们暂时决定用低糖DMEM,这是否有影响?
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报纸
发表于 2016-9-8 15:33 |只看该作者
回复 荷荷 的帖子
9 ~8 B) p; `, {6 \; I* N; L! n) Q' j% M4 Z9 J& h
谢谢啦!

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地板
发表于 2016-9-8 15:33 |只看该作者
回复 15891778445 的帖子
% m5 j9 Y# e3 Q$ _2 \4 f3 Y/ i( }# ]
万分感谢!

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7楼
发表于 2016-9-8 15:40 |只看该作者
回复 UlissesJR 的帖子1 \( f3 O1 d+ ]5 D; Z/ B; ]6 t# p

: |; m! m6 o% Y' m万分感谢!

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8楼
发表于 2016-9-8 17:14 |只看该作者
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8 [+ s3 O: V" l
4 [7 _2 S1 Z  i$ t1、体积看你用量多少了,只要浓度没错就行。
& p* E( [3 N- q' r2、高糖更利于干细胞分化
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9楼
发表于 2016-9-9 11:09 |只看该作者
gibco有专门的盒子,买那个省事儿
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10楼
发表于 2016-9-10 05:56 |只看该作者
同意楼上,用的少的话直接买kit吧,想当年我都是自己配的,挺麻烦的
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