脐带间充质细胞形态的问题

gm3771052

最近养了一批脐带间充质细胞，从一代到三代细胞的形态还比较稳定，至少是梭形，虽然有些个体比较大。# s5 @8 ]; P# O" w5 E! r9 _9 N0 d
但是等我传到第四代的时候细胞个体居然变了，成了不规则的圆形，椭圆形。而且细胞周围边缘也比较模糊
1 N/ A  R! a( C, R# T9 I* y想问下有没有其他朋友也遇到过类似的问题，是什么情况导致的。
. D& l4 e1 \1 m; J! g: P2 u你们是怎么解决处理的，有没有什么好的方法 ！谢谢！& J+ R4 }" ~: R& K6 P  X" h

yingfeixiang

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8 U7 x1 Q0 t- `# g从你的描述可以看出来，这个细胞生长的状态不是特别好，前三代就有这个现象，之后加重了，这个一般是个体原因吧，没有什么好的解决办法

修行

1：自分化了。发生自分化后没有解决办法。: t  D6 U+ Y9 J# u4 k! ~+ }4 P
2：建议排查自己培养中所用培养基和因子，寻找原因。

cuijiaoyan

跟你的接种密度也有关系吧，密度太小容易老化和分化。

sunny2829

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, N+ ]  A: X+ C3 K; hP1-P3应该是短梭形，个体比较小。个体比较大，就有可能是分化或者老化了。
2 a* A: i+ s  B* l: a! @' f' G+ [P4成了圆形，就应该是老化了。+ m5 E: i( h8 @; |2 o8 w: [
你应该先确定培养基是不是脐带干培养基，因子添加有无问题。
: c7 N% \# u! T( k$ l若没问题就是实验操作的原因导致细胞老化，如脐带运输冷藏时间过长，原代操作时间过长，组织块干燥，细胞密度太稀或者太密，酶消化时间过长等等，都有可能导致细胞老化。
5 N: |1 V4 V" J0 m4 Y( a. h个人经验。

gm3771052

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; L* X, d* v6 x! x) b" j3 L+ \8 K
培养基无血清的 ，有没有推荐？

sunny2829

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  ~. B8 [' E: \  I- L, G% ?GIBCO的，文献较多。6 [8 D5 v4 z: j
LONZA的也不错。资金充足的话可以买来试一试。

kiss2346

应该是培养基不是很适用

15122224893

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很近