细胞复苏需要离心吗？

yinchong42

我感觉，如果细胞量比较少或者细胞比较脆弱容易死，那么建议还是不离心，复苏以后多加两倍的培养基，DMSO稀释到0.5%-1%的情况下对细胞的杀伤毕竟有限，7 q& f4 ?# |2 S. f9 M8 Q' K9 C
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然后依照细胞的贴壁速度而定，像有些细胞比如MC3T3-E1之类的细胞，2个小时就基本上倒不掉了（不过我还是会等到三个小时，因为按照我的经验，如果每次都刚刚贴壁就把细胞倒掉，长此以往，不易贴壁的那部分细胞就会被淘汰掉，这样就会影响细胞株的形状了），这时候直接换液就行，然后过12小时再换一次液，这次换液以后，一般来说细胞生长状态都不会太好，这时候等细胞密度到70%左右时，把细胞消化下来重新贴一次壁，长满了再传代之后就可以用了，，，

zhx1912

回复 baby00000003 的帖子
; c  Z/ P, R9 v; n
/ q% @6 l. h1 v7 R9 b4 N; I# P非常感谢！

splinkerette

我觉得离心对于细胞的损伤应该不大吧，毕竟每次传代都要离心一次。。。如果离心这个操作本身都对细胞有损害，岂不是细胞在一直变差？
4 u  `, d; [3 t2 q我还是认为应该要离心的，把DMSO去除干净，干细胞相对于肿瘤细胞更加敏感

zhx1912

回复 yinchong42 的帖子1 ~5 V: _: K; }, Z5 s: p7 [! l
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很好的经验分享，谢谢！

zhx1912

回复 splinkerette 的帖子5 k) o. e! T& C# h/ I
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谢谢！

晗晗

不可以吧，细胞复苏都需要离心的，因为DMSO有毒，对细胞有损伤，所以一定要离心

天龙八部

普通细胞复苏后直接加新鲜培养基，第二天换液。
5 S+ ]& r1 f7 p5 i' }" \1 K/ h干细胞和MEF都先离心去除DMSO，没试过直接加培养基。

zhx1912

回复 天龙八部 的帖子+ Z, t* T/ y  ^9 U$ J' F0 Q  O
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OK，谢谢了！

chrcs

一般会离心去除DMSO，DMSO对细胞具有一定的损伤性

晗晗

当然需要离心啊，因为DMSO有毒，离心的时候可以把DMSO除去，否则会影响以后细胞的培养