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楼主: 微笑流滢
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[请教] 基因扩增不出来   [复制链接]

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发表于 2016-12-26 18:21 |只看该作者
1.看样品有没有问题,可设个阳性对照;2.因为GC含量高,可多设几对引物扩增;3.多换几个公司的Taq酶,最好换大品牌的公司,如Kapa、Takara等。
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发表于 2016-12-27 09:39 |只看该作者
PCR有时候很古怪,换个聚合酶,换个条件,换个引物都会有可能,我以前在难扩增的体系里加入betaine,类似DMSO的作用,有时候很管用
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发表于 2017-3-1 08:55 |只看该作者
回复 dollar777 的帖子8 N$ Z4 G; ]0 c6 U1 n; T
  V* |; N0 K$ c, |2 g) W
亲,已解决,加10%DMSO就可以了
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发表于 2017-3-1 08:56 |只看该作者
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回复 luomengwu 的帖子  Z" \) v; T' a: g2 y
+ E' P; L) h8 n( r+ V2 I3 q0 E8 u
亲,已解决,加10%DMSO就可以了

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发表于 2017-3-1 08:56 |只看该作者
回复 xuyang0317 的帖子
4 L/ v+ ~1 y' X5 E" j
4 u5 g- ?& w1 d1 u5 d# \& k6 L亲,已解决,加10%DMSO就可以了

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发表于 2017-3-1 09:18 |只看该作者
1.你做PCR实验选用的模板有可能本身含有你的目的基因就比较低,建议你换模板试一试。
  V, n, W7 X. R4 C. N8 U4 k1 u7 C8 J2.复性的温度试几个温度。
  L5 @9 d8 z) B) x' _3.延伸时间稍微长一点。$ e3 x0 B0 h. A, k4 j
4.分段进行克隆,祝好!
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