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楼主: 微笑流滢
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[请教] 基因扩增不出来   [复制链接]

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11楼
发表于 2016-12-26 18:21 |只看该作者
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1.看样品有没有问题,可设个阳性对照;2.因为GC含量高,可多设几对引物扩增;3.多换几个公司的Taq酶,最好换大品牌的公司,如Kapa、Takara等。
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12楼
发表于 2016-12-27 09:39 |只看该作者
PCR有时候很古怪,换个聚合酶,换个条件,换个引物都会有可能,我以前在难扩增的体系里加入betaine,类似DMSO的作用,有时候很管用
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13楼
发表于 2017-3-1 08:55 |只看该作者
回复 dollar777 的帖子
3 H) e) o( n# i/ C2 E4 R! }8 q
& m  Z  [! [9 \, k7 l亲,已解决,加10%DMSO就可以了
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14楼
发表于 2017-3-1 08:56 |只看该作者
回复 luomengwu 的帖子
8 ]4 l$ a5 o# b( u: @2 }5 i8 |8 x: q# M6 w4 S% k& e, u+ [* ?
亲,已解决,加10%DMSO就可以了

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15楼
发表于 2017-3-1 08:56 |只看该作者
回复 xuyang0317 的帖子
4 N* Y; a9 p* O+ O% g5 v. M  M: r# H8 ]" s
亲,已解决,加10%DMSO就可以了

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16楼
发表于 2017-3-1 09:18 |只看该作者
1.你做PCR实验选用的模板有可能本身含有你的目的基因就比较低,建议你换模板试一试。
0 \' J% C$ `" A: i3 g2.复性的温度试几个温度。- n! J2 d& w, Y8 f+ S. A
3.延伸时间稍微长一点。
2 s, g( U- t( L$ @$ \4.分段进行克隆,祝好!
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