MSC问题请教

in007

小弟最近准备作MSC的实验，但是看到众多分离MSC的方法不尽相同，对于密度梯度离心，主要有以下三种说法：
2 @# A' y0 X8 X  R一是直接采用离心后接种；
  x$ |, c& h3 h& Q; S& n1 @" r8 ]4 S二是先离心去掉脂肪等杂志后再用淋巴细胞分离液分离，然后接种；" x1 t8 J9 u! D( w
三是先用分离液离心后抽取白色云雾层，再次离心后取细胞沉淀。
7 V1 S% v# V& ^% f* f4 G% J* c请问哪种方式效果最好？再就是两次离心分别采用多大的离心力（请用g 表示）和时间？

笑可依

如果是人源、兔源的，就用密度梯度离心法第三种，percoll或ficoll分离液离心（900g,30min)取白膜层,再次离心（400g,5min)后弃上清，接种。! a# p0 Y9 M$ h- U" D
如果是鼠源的，因为骨髓量本来就很小，就用全骨髓培养法，将骨髓冲出来、收集，离心（400g,5min)后直接接种。

mbjane

谢谢

烂桃

用分离液密度梯度离心后抽取中间白色层，要再用缓冲液洗两遍