我养的NK细胞第六天的，健康人外周血，请教下，大多数细胞团贴壁很牢，吹打都不能完全

cyl黄金杖

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NK细胞属于半悬浮半贴壁的细胞，从你发的图片来看，第六天细胞长成这样，NK纯度还是不错的。贴壁细胞团块过大，说明操作不及时。操作之前，需要适度力量怕打培养瓶，使贴壁细胞脱落培养瓶，拍不掉的，再用移液管吹打。为什么会沿着培养瓶四周贴壁，是因为4周往往是移液管吹打不到地方，越长斑越大，前几天细胞会自然贴壁，每天观察的时候要拍拍瓶子，大约6、7天开始细胞基本都是抱团悬浮的，像LZ第三张图片左半边部分的那些集落是不错的。

地球外世界

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$ d  f" E. h7 x" o# W' l- x9 m培养NK培养到第几天，成熟，表面CD3-CD16+CD56+多少算正常？培养到多少天终止培养？

地球外世界

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5 M, T8 k8 E$ I' D
, A) U$ ?7 q+ j; C* o& Y细胞状态感觉挺好的。团怎么会那么集中，而且大，厚？你是加凝集素之类的物质了吗？

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子1 _0 A5 C+ O* K9 X% {4 o. t% U
, X! y6 d3 \9 w* u+ B( K. K
回输最好时间是13-18天，没文件性要求规定表面标志物要达到多少算正常，各实验室培养的方法不一，一般可以达到30-60%吧，最好的有70-90%

淘知路遥

回复 地球外世界 的帖子0 L7 Q. v3 E3 ?0 `; t4 m9 v2 a
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回输最好时间是13-18天，没文件性要求规定表面标志物要达到多少算正常，各实验室培养的方法不一，一般可以达到30-60%吧，最好的有70-90%

淘知路遥

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5 A+ v5 y- Y0 |  g6 C% e3 b0 M& I) B, w/ Q6 _1 ]
没有加咧，我们的细胞培养到第4天一个镜下区域有几十个如你图3左半边那种团块，出现图3右边那样的情况个人感觉是没有把细胞拍散，导致细胞大量集中贴壁

快乐男孩

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nk可以养到21天，流式CD3-要达到60%以上。

lihaifeng

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' H1 I  y6 g8 S. E8 H2 R% |请问NK细胞密度一般到多少需要调整，调整到多大密度？

细胞之家

回复 lihaifeng 的帖子5 P" C% [" h+ w

3 v7 z, A2 w9 N  ?2 O一般密度控制在1-3E+06之间，不过不同的培养体系，增值情况不同，不同的外周血也不一样，要自己摸索。多做几批次，试试。

shy-shen

回复 快乐男孩 的帖子- A* U4 L9 x7 u( U2 W. U6 h% S% W: N

: X4 q6 S8 q, |) f- D; E你添加了什么因子，我现在做NKT的研发，有些贴壁很牢固，有些几乎不怎么贴壁