我养的NK细胞第六天的，健康人外周血，请教下，大多数细胞团贴壁很牢，吹打都不能完全

金鹏

细胞状态不错，前面几天观察的时候如果发现有聚集成较大团块的趋势建议进行轻轻拍打、摇晃，使细胞分散均匀，在后续的培养过程中也不建议细胞聚团过大。细胞贴壁比较劳的话强行吹打肯定会有较大损伤，轻轻吹打，吹打不下来的细胞建议不要，目测LZ细胞的状态可以进行后续培养的细胞进行扩增之后完全能够满足后续的实验需要！细胞沿着瓶四壁聚集，这种情况我以前也见过，在培养瓶放入孵箱时，你平着轻轻摇晃瓶子使细胞分布均匀。

liuyunmeng2002

都在四周说明一开始就在四周，铺瓶时没有让细胞均匀分布，在铺瓶操作后，可使培养瓶平放。

免疫与细胞

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0 F8 ~' t0 s; s/ ~. H不要刮了，拍打瓶子或吹打都可以，建议转到新的瓶子里培养，每隔2天就观察，拍打混匀一次。) M; k; H, a' q$ T, c* `2 B

$ H4 ~3 r& {) i. v6 f& K. B你这细胞培养的应用很充足啊，这是打过动员剂的还是受伤人体来的，那些贴壁的形态有异，开始有MSC样的形态。

shy-shen

您好，我想问下你是用什么因子刺激的

ch15594152551

有没有NK细胞操作流程
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yangzeqian

NK细胞会有部分贴壁，并且抱团会越来越大，每次补液传代的时候轻柔混匀，如果用的是T175瓶，轻拍瓶侧可以使贴壁细胞脱落；用袋子的话轻柔袋子的D区，悬浮培养。# ^$ Y3 X, I' Q- ~; B( L3 u
贴壁过牢解决方法：可以拍动（自己把握力度）瓶侧使细胞脱落，基本不会贴的用到细胞刀的程度。细胞状态很不错，NK的生长速度很快，注意及时传代补液。

romanyuo

是不有NKT细胞贴壁？建议可以做个流式细胞仪，CD56+CD3+就是NKT了

曦馨橙子

前期贴壁细胞是筛选出去往DC方向的细胞，NK细胞是悬浮的，NK细胞浓度不要太高了~~用培养袋养效果会更好，也更安全~

鑫鑫向荣

成团的话，应该是后期会散开的。你这个团有点大。个人觉得可能密度太大，换成培养袋试试。吹不下来的可能还不是NK细胞，继续诱导有可能会变成NK。细胞刮刀是可以用的  我们经常用的，但我们的贴壁没有你这么多