间充质原代传代问题

cuijiaoyan

0.25%的胰酶一般消化1-2min，一般4倍镜下观察就可以，没必要高倍，我们一般消化1-2min，然后终止消化。消化不下来的细胞可能是杂细胞就不要了。

金鹏

根据你描叙的情况，可能是血清残留较多，FBS清洗情况不佳，也有可能是你使用的消化液有问题，可以换一换。正常情况下一般消化个2~3分钟大部分都能消化下来，具体时间还需镜下观察，觉得10倍不好观察，可以配一个4×。消化的时候，消化液一定要完全覆盖底部

wangddk

1分钟就可以了，最好稀释。

漾轩

0.125的胰酶T25 1ml，T75 3ml，用之前恢复至室温即可，胰酶加入后放置1分钟，显微镜观察细胞变圆，细胞与细胞间有间隙，可轻微拍打，3分钟消化完全，也不一定非要看到细胞全部变圆，只要分散开就行了，细胞不要成团就可以了

xiaoyuwsp

先用PBS洗一次，弃之PBS，再加配制好的0.25%的胰酶消化液，一般轻轻摇晃，很快就行了，如果个别消化效果不好可以再加入已配制的0.25%的胰酶消化液1-2毫升。肉眼就能观察到消化的效果，显微镜下4倍下观察，10倍也行。注意消化液的浓度不能随意增加，并控制好消化的时间，否则会损伤细胞，影响细胞生长。

crystalwing

先用PBS或生理盐水清洗一遍，加1-2ml胰酶（覆盖培养皿即可）消化1min，消化过程中可以轻轻摇晃培养皿，加5ml左右培养基终止消化，用移液管轻轻吹打细胞，显微镜下观察细胞是否铁壁

kiss2346

一般都用0.125% 4min   加胰酶之前要用PBS或者盐水清洗一下 去除培养基    0.25%的话  差不多2min左右就可以了  

木木木木

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% w0 \, h4 J: L这个头像是迪亚曼蒂吗

fm001982

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木木木木

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哦哦，茶叶啊