BMSC成骨诱导细胞大面积脱落

郑卓越

      本人现在做大鼠BMSC成骨诱导的实验，选用的是P4代细胞0。25%胰酶消化1min，培养基中和消化。
8 \8 e$ L0 s" A2 o( ^/ Q. [; i1 V      2*10^5铺到六孔板中，细胞长到50—60%时开始诱导（大约为铺板后第二天或者第三天）。
: a4 Q5 y* w9 ~; g      每两天半量换液一次，加液的时候特别小心，生怕它们脱壁。$ `8 U; b3 w5 P7 ]. H3 t+ P
      可他们还是在加入诱导液17、18天后开始大量脱落。做过很多次都是这个样子了。
+ n$ y) ]/ E) n& H+ Y      真心请教到底是哪地方出了问题。

2017-3-30 10:42 上传

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细胞脱落之后样子如下。

baby00000003

是细胞长得太满了，从边缘卷起来了吧.....适当降低诱导培养基里面的血清浓度试试看，比如，1%？

zhu1019

诱导前铺板子的时候，把板子事先用多聚赖氨酸包被一下，会好很多。换液时贴着壁缓缓加入，轻拿轻放。

13153546906

我们实验室也做了成骨诱导分化实验，不过用的是人的脂肪细胞诱导，成骨细胞分化之后就是容易脱落，我们是用的0.1%的明胶包被，就会很好的缓解这种情况

luoziwei

请问你BMSC的成骨诱导成功了吗

淘知路遥

做过诱导成软骨容易脱落