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脐带间充质干细胞组织贴壁法培养,一般多长时间就可爬出细胞?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-5-12 14:21 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问各位,你们培养的脐带间充质干细胞用组织贴壁法,贴壁的组织块一般多大?一般多长时间可以爬出细胞?多久可以第一次换液?什么情况下就可以去除组织块?: \9 d  \" r! d. x5 K
自己接触UC-MSCs时间不长,一切都在摸索着,想听听大家都是怎么做的,怕自己做错了还蒙在鼓里。
; V9 B! O- S7 ]5 u7 t+ b谢谢大家~
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沙发
发表于 2017-5-12 14:48 |只看该作者
7天到10天出来。组织越小越好,第一次换液时间可以长一点没事,7天。细胞爬出来就可以去掉组织块
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藤椅
发表于 2017-5-12 16:01 |只看该作者
7-20天,不到20天坚决不要放弃,组织块的话2mm*2mm左右吧,看培养基颜色,不变黄就可以不换液,等细胞爬起来了就把组织块去掉。
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板凳
发表于 2017-5-12 16:46 |只看该作者
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fenglinzhu 发表于 2017-5-12 16:01 ) X& |5 X- r+ m  c2 J. Y: Y/ t0 l3 G
7-20天,不到20天坚决不要放弃,组织块的话2mm*2mm左右吧,看培养基颜色,不变黄就可以不换液,等细胞爬起来 ...

* K! A, H" a$ d' c. p而且组织一般可以重复用2-3次,每次收获的都可以算作P0
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报纸
发表于 2017-5-12 22:46 |只看该作者
我的5天
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地板
发表于 2017-5-13 10:04 |只看该作者
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- g6 F* P5 Q! }7 L& f; I8 T0 M4 w# R9 g2 C2 u5 l6 t
贴壁法组织块大小文献报道不一,1x1cm、2x2cm都有,关键在于的要取华通氏膜,否则会有大量的内皮细胞,2在初期可用少量培养液,保持组织块湿润即可,待完全贴附后再加入适量培养液,一般5-7天后有细胞从组织块边缘长出。
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发表于 2017-5-15 12:02 |只看该作者
3-20天都有可能,一般5-7天
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发表于 2017-5-15 13:23 |只看该作者
谢谢大家的回复,收获很大。
2 `0 i0 o- j; |0 y# x( Z( |' r" Q我的组织块已经六天了,培养皿中只有1、2个组织块有爬出细胞,细胞数还是个位数,再等等。
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发表于 2017-5-15 15:03 |只看该作者
一般7-10天就会有细胞爬出来,在第7天时进行全量换液,仔细观察培养瓶。
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发表于 2017-5-16 09:13 |只看该作者
3-14天爬出最好吧,时间越长细胞状态会越差,组织块大小2×2是可以的,如果能剪得更小1×1最好了,根据培养基消耗情况进行换液。
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