
- 积分
- 1
- 威望
- 1
- 包包
- 1
|
肿瘤干细胞(tumor stem cells,TSC)表现为一种特殊类型的干细胞,具备高度增殖能力与自我更新能力,也具备多向分化的潜能。TSC增殖过程中,通过不均一分裂,一个TSC分裂形成一个新的TSC和另一个可最终分化为包括肿瘤细胞在内的各种细胞的子细胞,其结果是维持TSC数目稳定并产生肿瘤。肿瘤如同人体其他组织,也是由具有不同增殖潜能的异质细胞组成,这些细胞的很小一部分能通过移植产生肿瘤,这一小部分细胞被称为TSC。它有着干细胞的属性即自我更新和分化能力。有学者将其定义为:能分化出不同表型的非致瘤性肿瘤细胞,而且也能自我克隆产生子代致瘤性细胞的肿瘤细胞。
% ^4 N- k3 U" w% ~- M" ^$ Y, I目前主要的分离方法有荧光活化细胞分选系统(fluorescence activated cell sorting FACS),磁性活化细胞分选系统(magnetic activated cell sorting MACS) ,免疫磁珠,组织培养瓶铺展贴壁等。最高效可靠的分离方法是FACS和MACS。FACS是应用最广泛的细胞分选方法,每个荧光标记的细胞在通过激光束时进行物理参数和荧光的检测分析和记录,通过这种方法可获得极高的纯度。以上分离技术有赖于干细胞表面标志物的识别,目前已明确的有:AML肿瘤干细胞为[Thy1-,CD34+,CD38-],乳腺癌干细胞为[ESA+,CD44+,CD24/low],脑肿瘤干细胞为[CD133+]。另外,干细胞还有不同于一般分化细胞的物理特性,比如干细胞不被染料Hoechst33324和Rhodamine123染色,利用这一特性,采用FACS技术就可从单细胞悬液中分离纯化干细胞。6 p0 B; a" Q" H# t7 J
肿瘤细胞有永生性,但事实上肿瘤细胞在体外培养时不易生长,这可能与生存条件与体内不同,肿瘤细胞自泌被稀释,分散培养及成纤维细胞的排除使癌细胞之间或癌细胞与基质或纤维细胞之间依存关系的破坏,及有强生长活力和长生存期的干细胞数量少有关。肿瘤细胞有自泌或内泌性产生促增殖因子的能力,体外培养时在低血清中(2%~5%)仍能生长,但为了获得好的培养效果,可根据细胞种类不同向培养液中增加一种或几种生长因子。由于干细胞数目很少,因此需要在体外对干细胞进行非分化性增殖。这也需要许多生长因子和间质细胞的共培养。目前神经肿瘤干细胞常采用的是无血清的神经干细胞培养液,其中添加了表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF),碱性成纤维原细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,BFGF),神经营养因子(neuronal survival factor,NSF)和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)。 |
-
总评分: 威望 + 1
查看全部评分
|