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楼主: jiandie
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分离脐带间充质干细胞,收标本问题   [复制链接]

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发表于 2017-5-25 16:28 |只看该作者
回复 fm001982 的帖子2 W9 ]- t  X* j' U9 r

6 l/ ^* ^) {0 a* R. R4 k谢谢,你们一般处理脐带多长时间
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发表于 2017-5-25 16:28 |只看该作者
回复 理科小文艺 的帖子. t1 o. a+ I2 T6 c; b
1 _' @$ |  A1 ]/ f2 z+ M$ S
没拧紧的倒是也没污染
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发表于 2017-5-25 16:29 |只看该作者
回复 444352110@qq 的帖子
' Y5 W: s( P" G2 T7 r% F1 t0 R7 W6 x0 K- J4 ?
操作两次是差不多的,可能是处理时间太长了吧。。
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发表于 2017-5-25 17:02 |只看该作者
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标本的问题吧,我们处理都是很随意的也能长
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发表于 2017-5-26 09:10 |只看该作者
jiandie 发表于 2017-5-25 16:25
' A" u/ a( L" O- _, x; H) O回复 zuishui 的帖子
3 q3 F. K' m& `
6 Z% A% N7 C2 z1 S: h第一次出细胞贴壁,第二次没出细胞。。
, l; V) r( b2 W+ d  k, M
我是问贴没贴上壁,是不是因为没贴上所以不出的~
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发表于 2017-5-26 09:11 |只看该作者
你没有提到你用的什么培养基啊,难道干贴啊?
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发表于 2017-5-26 10:47 |只看该作者
回复 zuishui 的帖子
! ?8 x( g; _5 C- I" B# S' c
- P6 Z- T4 ~3 A) Y1 s: j4 G$ M7 W先干贴让组织块贴壁,6-8小时加DMEM/F12
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发表于 2017-5-26 12:01 |只看该作者
收集脐带注意事项:1、脐带保存液无菌,脐带保存容器密封性要好,采集脐带时最好进行两端结扎(取中间部分)    2、运输温度4度最好,常温放置几个小时问题不大    3、从采集到分离时间间隔24h是没问题的,肯定可以爬出细胞   4、分离前最好用75%酒精对脐带进行清洗,清洗时间不宜过长   如果上述几点都没问题的话,那就不是采集导致的了,可能是脐带本身状态不好或者培养基不行 。     
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发表于 2017-5-26 17:00 |只看该作者
体系的问题,我们采集的样本都是很长时间的,72小时都没养不出来的。一般来说要求48小时内。你的采集方式影响不大,关注培养体系,即使你培养出来也15天了,时间太长,这个时间我们基本都可以冻存了,用的就是贴壁法
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发表于 2017-5-28 07:18 |只看该作者
最近培养的一根脐带,25天才爬出几个细胞,培养脐带需要有耐心等待,不要轻易放弃。( |1 P- V1 e# l: |! J
双抗清洗时我一般浸泡5分钟左右。
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