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细胞复苏有哪些地方需要注意呢,为什么我复苏的细胞死了那么多   [复制链接]

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发表于 2017-6-27 09:47 |只看该作者
回复 爱学习的青年 的帖子
$ u# Y( g3 b2 k% p* A/ V/ j: H( d1 b# Y4 {+ r0 h$ g. m' v
细胞复苏时间要快速,在水浴锅复苏时,可以适当的摇晃,加快融化速度,最好在30s完成,不能超过60s,不能速融对细胞损伤较大,不利于之后的培养及使用,还有在复苏是要提前准备好盐水,速融之后马上稀释离心。
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发表于 2017-7-4 11:38 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子& ^; r  E1 |- N1 E, T# \( Q* P/ u. r
, T& j1 A. e2 O( J' `# m
再次请教一下,用这种方法的话,细胞液是全部融化再转移还是剩一点冰晶就转移
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发表于 2017-7-5 13:58 |只看该作者
操作速度快、细胞冻存液除去,当天换液, ^' F9 S5 i( g" W5 I5 V, w
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发表于 2017-7-6 16:17 |只看该作者
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回复 long3390hai 的帖子
& E! q* ]- G5 q- N, ~1 w4 @) r( Y) t. U' U0 y* \& ^/ Z) I
龙啊,你真是理论王子,实际操作肯定超过60s
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发表于 2017-7-6 16:18 |只看该作者
回复 爱学习的青年 的帖子* d' X7 `& s: ~6 b. p7 P, G; {
- J/ T3 T6 v2 X$ R/ f1 ]# M6 H) ?
剩下冰晶就行,等到全部融化了,温度上升很快,温度高DMSO对细胞的毒性就高了,影响活率
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发表于 2017-7-6 17:07 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子/ o9 m1 P9 {, r/ ^8 q

1 F1 a% m9 D! C  w# x1 B( F练习次数多了就OK的,我的理论还是可以的' S  p9 }1 W1 c9 b+ \
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发表于 2017-7-6 17:20 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子
8 D! m7 c# _7 n% K9 p6 X
3 k* g8 X: u, A$ n2 V: `0 O谢谢,这几天正打算复苏细胞,就按这方法复苏

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发表于 2017-7-7 14:09 |只看该作者
回复 long3390hai 的帖子( J# q% [: R+ i
" ?' F6 I& o( d7 |4 o0 J5 r
这个逼给你满分了,练习了几百次了,哈哈

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发表于 2017-7-7 17:40 |只看该作者
wuhuaguo88l 发表于 2017-5-31 15:15 0 F' \3 u7 \! ?; z8 r. `! R
当天复苏可留少许细胞,测一下活率,若活率不高,分析一下是否当天操作不当或是细胞冻存就有问题;若是活率 ...

2 F# C/ S# e5 o) [3 m这个也是我想知道的问题,前几次都可以的,为什么这次不行了,细胞数还是冻存技术的问题呢?
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发表于 2017-7-7 18:15 |只看该作者
rzghc 发表于 2017-6-1 08:33
% L$ w$ ?- b. W9 O* }先准备好水浴锅,复苏的时候用冰盐水,不要等细胞全融化,稍微有点冰晶的时候就可以操作了,操作过程中基本 ...

# H5 A. N" {. I8 }0 C3 A: s9 L# S# d- w这里有很多行家,学习
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