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请教一下,大家脐带间充质传代方法以及传代密度。 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-6-8 13:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
第一个问题:原代细胞胰霉消化后传P1接种密度,请大家给一个建议,我是使用T75的瓶子贴的组织块,基本上细胞爬出来70%-80%后消化传代。- R- v1 q( C9 p9 {% U
第二个问题:后续传代请教大家多数使用哪种传代方法?胰霉,还是细胞刀刮?P1-P2-P3请教大家的接种密度。

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沙发
发表于 2017-6-8 13:46 |只看该作者
接种密度:6000-8000/cm2,消化用胰酶就行了

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藤椅
发表于 2017-6-8 13:50 |只看该作者
回复 yangzeqian 的帖子
) q8 _" B) P1 x9 d) |7 c+ B  \* Y6 A6 i, v0 f
主要看你细胞的用途啊,实验用的话建议用胰酶,用细胞刀对细胞的伤害比较大。如果是临床的话就用细胞刀吧,因为胰酶是不能用于临床的。接种密度的话0.5-1*10^6每瓶(T75)

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板凳
发表于 2017-6-8 14:55 |只看该作者
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- P  H" x8 h0 U/ W接种密度:5000/cm2左右,0.125%胰酶消化,很容易消化下来,不用刮刀。不要长太爆,不然会脱落了

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金话筒 优秀会员 小小研究员

报纸
发表于 2017-6-9 10:11 |只看该作者
现在大部分的都是姨酶消化传代      方便实用     操作简单    75瓶每瓶传代在1.0~2*10的6次方左右      传175的话在2~3*10的6次方左右    细胞长势较好   而且时间短     希望对你有用

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地板
发表于 2017-6-12 09:53 |只看该作者
用0.125%的胰酶消化没错,不过消化之前37度预热最好。

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发表于 2017-6-12 11:49 |只看该作者
我们消化是用0.025%的胰酶,也用过gibco的tryple expless,很方便,不过出于成本考虑还是换成了胰酶P123一般传代密度都是5000/cm2,有时也会调整到2000-5000范围,都可以长得很好

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发表于 2017-6-12 14:09 |只看该作者
用0.03的胰酶就行,浓度太高对细胞伤害较大

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发表于 2017-6-29 14:46 |只看该作者
回复 2357710447 的帖子# S$ D* f; p+ e2 f$ ?
( ]" j! Y) Y% @+ B
很好,谢谢你的方案
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