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楼主: niufen
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我的脐带MSC为何出现核溃散!(看图说话)   [复制链接]

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发表于 2009-11-25 00:21 |只看该作者
我的细胞和你有同样的情况,不知道你的问题解决了?给点建议!

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发表于 2009-11-25 17:08 |只看该作者
MSC培养时,即使只是用10%胎牛血清的DMEM/F12培养基、不添加其他生长因子,通常也能传到4、5代呢!不会到第二代这么快就增殖能力不行了、而且形态还那么不好的!从你细胞照片上看,细胞形态明显发生改变,向血管内皮样细胞形态转分化,并且细胞严重老化,通常出现这种情况后,细胞增值几乎停止,很快就会脱壁并死亡。你还是好好检查一下你的培养条件吧,看是不是有什么试剂或药品用得不对,还是在培养过程中有什么操作错误?再重复做下验证吧!
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发表于 2009-11-26 00:31 |只看该作者
这不是“核溃散”,而是死亡细胞碎片和培养基血清的析出成分的黏附,UCMSC分泌大量粘性物质,其膜表面与胞外基质相关的黏附分子基因表达很高,细胞间特别容易聚集成团,贴壁细胞也容易吸附各种碎片。这些都是正常现象,虽然似乎很“脏”很不好看,但是消化很容易的MSC不要过度消化就行了。建议换液消化前用大量PBS清洗,不能剧烈吹打,适度的,不能产生气泡,难消化的细胞舍弃(可能分化了)。消化后完全培养基中和离心后再加20ml吹打清洗,然后再加pbs20ml清洗,虽然损失不少,但可以较好的改善,恢复较快的生长。
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发表于 2009-11-26 08:41 |只看该作者
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    一般较长时间消化不下来的也不用管它了,这一般是形态较大或老化的细胞
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发表于 2009-11-26 23:04 |只看该作者

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发表于 2009-12-16 23:45 |只看该作者
感觉像是电镜焦距没调好,视乎不是污染……
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发表于 2010-1-27 21:53 |只看该作者
这细胞明显老化,快要死亡了。培养基出问题了?
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发表于 2010-1-28 10:23 |只看该作者
很明显的细胞老化
5 u8 _) p& H8 B1 z' l) ^- j" Q' ]/ x/ d和我传到二十多带的时候差不多
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发表于 2010-1-28 16:46 |只看该作者
骨髓MSC很难养啊

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发表于 2010-1-28 21:31 |只看该作者
可能培养条件,消化时间,酶浓度,有没有支原体污染。
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