我的脐带MSC为何出现核溃散！（看图说话）

sijicc

每个批次的血清的质量都是不一样的，国外进口的好，但我们要做对比试验来验证。

yanwugxf

估计是传代密度的问题吧......我在做的时候也遇到过这种现象，细胞长的很慢，而且变大变扁平，出现凋亡。控制传代密度，接种时密度不要太小。

hnsdlgl

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niufen 发表于 2009-8-9 09:57 " O2 A6 F3 v, w, z/ O8 J
人脐带来源MSC，10%胎牛血清DMEMF12培养基，到第二代增殖能力就不行了，很难长满。然后就出现了如图所示的胞 ...

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估计消化有点过了，然后导致细胞受损严重，出现这样的情况，这瓶细胞已经没有实验价值，不能再养了。3 o5 c7 w2 u6 W" l) L
- s6 e: @/ }( p* L: e* J7 v
本人觉得UCMSC很好养的，我没加过细胞因子，只是用10%-12%的进口血清养，效果很不错，消化时最后不要用吸打，建议用拍瓶的方式。
2 J- G6 `# x( S% E/ E3 j' {具体过程，请见“我的小鼠骨髓基质干细胞正常吗？”（第8楼我的回复）+ r& q+ O/ X$ r, V$ u/ t
http://www.stemcell8.cn/forum.ph ... mp;page=1#pid517995  W, m+ ^7 z! _

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顺便传一张我养的已经传代到第五代的UCMSC图片，供你参考

sdwzg119

我的细胞最近也是这个德性！焦头烂额啊！突然出现这种情况的！正在各种分析，各种查找原因，我感觉这个样是细胞老化，具体导致的原因正在分析，很是无奈啊！感觉是培养基里的某种成分出了问题，DEME、FBS、因子、等等........
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! o$ ^0 m& i6 k- u) N9 S& l" M不过逛逛论坛发现竟然有不少人也是这样！季节性的吗？

田甜

血清的问题，就算是GIBCO的血清，每批次之间都会有差异。最好是能筛选一下血清，然后多采购些备用。再就是考虑换无血清培养基培养吧，比较稳定。

deshenglll

有可能是分化了吧。要不就是细胞接种密度太低了吧。

xiaolong

会不会是消化时间太长了，或者传代时过于着急了，细胞数太少就传代了？

cactus006

回复 hnsdlgl 的帖子% f5 r' v. a# z

' |7 F0 [- C, Q# `2 {您好，我也遇到这样的问题，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，一直找不到原因，我现用的培养基是L-DMEM，hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，您能否推荐一款FBS呢，被细胞问题搞得寝食难安呢！

cactus006

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/ Z' x/ ?! n$ o! H- k& a
/ h% q6 ~) Q. K$ |  h您好，我也遇到这样的问题，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，一直找不到原因，我现用的培养基是GIBCO的L-DMEM，hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，您能否推荐一款FBS呢，被细胞问题搞得寝食难安呢！
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cactus006

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2 ?- Q' D9 `9 t8 ~# w6 l) F" z# w4 b0 ]. r, a$ k* a5 ^
您好，我也遇到这样的问题，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，感觉像是老化了，一直找不到原因，我现用的培养基是L-DMEM，hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，您能否推荐一款FBS呢，被细胞问题搞得寝食难安呢！
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