我的脐带MSC为何出现核溃散！（看图说话）

sijicc

每个批次的血清的质量都是不一样的，国外进口的好，但我们要做对比试验来验证。

yanwugxf

估计是传代密度的问题吧......我在做的时候也遇到过这种现象，细胞长的很慢，而且变大变扁平，出现凋亡。控制传代密度，接种时密度不要太小。

hnsdlgl

6 S- o& f5 o( B4 W

niufen 发表于 2009-8-9 09:57 1 b1 P2 b0 }  M$ L6 v
人脐带来源MSC，10%胎牛血清DMEMF12培养基，到第二代增殖能力就不行了，很难长满。然后就出现了如图所示的胞 ...

6 N4 e# q8 t( [# \' e5 {- o
2 J2 D& P; I: X- p, a估计消化有点过了，然后导致细胞受损严重，出现这样的情况，这瓶细胞已经没有实验价值，不能再养了。3 e5 r0 b% K- E: \! M5 r3 x

# E3 _/ ?2 {* o; d; }$ d6 w) Q, H6 e本人觉得UCMSC很好养的，我没加过细胞因子，只是用10%-12%的进口血清养，效果很不错，消化时最后不要用吸打，建议用拍瓶的方式。
8 K! J8 S/ G9 q. j- s/ ?具体过程，请见“我的小鼠骨髓基质干细胞正常吗？”（第8楼我的回复）+ L0 ^! ?1 ~) v
http://www.stemcell8.cn/forum.ph ... mp;page=1#pid517995( S5 u& T5 O% m5 T! o0 ]) G' @
5 g7 b$ r# ]% q% B; ?# h

4 M6 p5 P5 z0 C6 }+ O% ~, u; J3 L0 I# U! Q; S
顺便传一张我养的已经传代到第五代的UCMSC图片，供你参考

sdwzg119

我的细胞最近也是这个德性！焦头烂额啊！突然出现这种情况的！正在各种分析，各种查找原因，我感觉这个样是细胞老化，具体导致的原因正在分析，很是无奈啊！感觉是培养基里的某种成分出了问题，DEME、FBS、因子、等等......... X( {& Y1 O% `* h. j

. x( w& J  i- B. s& f2 }不过逛逛论坛发现竟然有不少人也是这样！季节性的吗？

田甜

血清的问题，就算是GIBCO的血清，每批次之间都会有差异。最好是能筛选一下血清，然后多采购些备用。再就是考虑换无血清培养基培养吧，比较稳定。

deshenglll

有可能是分化了吧。要不就是细胞接种密度太低了吧。

xiaolong

会不会是消化时间太长了，或者传代时过于着急了，细胞数太少就传代了？

cactus006

回复 hnsdlgl 的帖子
2 }, v, \* b6 n4 F% D3 J0 M; n3 Y& f. X
您好，我也遇到这样的问题，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，一直找不到原因，我现用的培养基是L-DMEM，hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，您能否推荐一款FBS呢，被细胞问题搞得寝食难安呢！

cactus006

回复 田甜 的帖子
3 c# e) F! _' z7 j
# e1 {" B  q* h% d您好，我也遇到这样的问题，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，一直找不到原因，我现用的培养基是GIBCO的L-DMEM，hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，您能否推荐一款FBS呢，被细胞问题搞得寝食难安呢！ 6 r. S+ m# ?. g0 ^9 f

cactus006

回复 zsc78 的帖子" X( U+ i' b0 A, a/ v1 B
0 K* @- z5 k. F' S+ d+ i2 g
您好，我也遇到这样的问题，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，感觉像是老化了，一直找不到原因，我现用的培养基是L-DMEM，hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，您能否推荐一款FBS呢，被细胞问题搞得寝食难安呢！ + E( u7 n6 \$ _" g% l! v7 K- g" l