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harvey

新手上路

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楼主

发表于 2009-8-18 21:20 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

用贴壁分离法分离大鼠的骨髓间充质干细胞，因为是贴壁法分离，所以要靠传代来纯化，到第几代才传代时可以继续使用上一次的培养瓶？每次传代都把旧的培养瓶扔掉，有点浪费。想请教各位战友是怎样做的？感谢！

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沙发

发表于 2009-8-25 16:18 |只看该作者

我想问你一下，不使用旧的培养瓶的原因是什么？怕促使其分化吗？我们养的是脂肪间充质干细胞，用的是培养皿，传代后也用上一次的培养皿，影响好像不大。传代纯化的效率能达到多高呀？是不是可以添加存进干细胞增殖的因子和抑制其他细胞生长的因子呀？

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flyingpnmc

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藤椅

发表于 2009-8-25 20:36 |只看该作者

严格来说，每次都应该用新瓶，这样实验结果更可靠。但国内一般都反复使用的一次性耗材，这对实验室来说节省成本，但对实验来说，可能带来不可预见的负面作用，可能你花的成本更大。

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baichunyu

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板凳

发表于 2009-8-25 21:32 |只看该作者

建议使用玻璃细胞培养瓶，也不是纯玻璃的，可以反复清洗，不影响细胞贴壁，要求高的细胞可以包被明胶。

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yunshi503

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报纸

发表于 2009-9-14 22:15 |只看该作者

到P2换新的瓶子 P3基本上就纯了

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烂桃

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地板

发表于 2009-9-17 08:43 |只看该作者

旧瓶子洗后有时内壁不光滑，会影响细胞贴壁，可以使用前先铺明胶，不过原代时最好还是用新瓶子

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mbjane

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美女研究员

7楼

发表于 2009-9-30 15:35 |只看该作者

学习

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