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求助:加入配型的血浆培养 BMSC 24小时培养基在培养箱里成凝胶了,谢谢 [复制链接]

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楼主
发表于 2017-7-13 13:47 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
加入配型的血浆培养 BMSC 24小时培养基在培养箱里成凝胶了,血浆在-20度存放2个月,血库购买的血浆融化分装后存储在-20度,谢谢2 D9 r. a" ~4 y2 G$ L3 s6 p
最近,培养 BMSC 怎么都养不出来,请问谁有 serum-free 体系么,谢谢

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沙发
发表于 2017-7-13 14:27 |只看该作者
血库买的血浆也要灭活的

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优秀会员

藤椅
发表于 2017-7-13 14:34 |只看该作者
回复 缥飘实验员 的帖子, F( T1 y" h6 x6 K5 |

" H# d8 b" k# m& V7 k( A血浆中含有大量高分子蛋白,这些蛋白在培养基中培养一段时间后会形成一层凝胶状薄膜,从而阻碍细胞呼吸,导致细胞死亡。56℃,30min灭活可使这些蛋白失活,可以很大程度的避免这样的问题出现,如果灭活后还出现这样的情况,可考虑用0.22um滤膜过滤,或3000G高速离心后取上清培养

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板凳
发表于 2017-7-13 15:38 |只看该作者
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回复 fenglinzhu 的帖子
/ c: r" \2 X  x  s. C* l3 g! M) E; P- k7 q9 D0 X* @, d
血浆是灭活的,估计要离心或者过滤一下了,谢谢
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