细胞冻存细节问题

随时准备下线

有疑惑的地方：1、准备使用的细胞梯度冻存盒是先4℃低温处理，还是室温就可以直接用？2、冻存液是从4℃拿出来直接加到细胞里，还是需要冻存液先恢复到室温或者37℃之后，在按比例加到细胞里？3、细胞冻存盒直接放-80℃过夜后转入液氮，还是先放4℃1-2小时或30-40min过度后，在转移到-80℃，之后转入液氮？

cuijiaoyan

细胞提梯度冻存盒我们一般是放置在4度，用的时候拿出来恢复至室温，将细胞用冻存液重悬之后放入冻存盒，放入-80度，过夜后放入液氮罐。冻存液我们一般是室温配制室温用。

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我每次细胞冻存盒都是室温，冻存液4度，放入细胞后，冻存盒在4度放1小时后，转移到-80度，过夜后放液氮

独自等待

冻存盒在4℃存放，冻存液从4℃拿出来后混入细胞，包括冻存管也是保存在4℃的，细胞灌装后随梯度降温盒与冻存盒一同放入4℃30min后，转入-80℃冰箱，隔夜后转入-196℃液氮里。

caoyu2

学习一下

金鹏

冻存盒室温就可以了，冻存液的话配置好后4℃保存半个小时以上再使用！

金鹏

-80℃过夜，再放入液氮就可以了

20062926

用程序降温盒一般先遇冷，冻存液最好也遇冷，你直接房冰箱的做法。其实就是程序降温盒的大致原理，在没有程序降温盒的时候可以这样做，放-80℃过夜就转液氮最好，如果确实样本少，一个月内转也行，对细胞影响不是特别大

weijunning

冻存液要室温平衡   冻存液要放在4℃平衡后使用，因为冻存液滴加过程中会产生热量  温度一高会对细胞有损伤  故建议4℃冷藏冻存液使用。