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楼主: yunxinxu
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各位资深研究员,我的细胞怎么了? [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2009-9-18 09:03 |只看该作者
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是不是细胞长过了,老化了啊?
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优秀会员 金话筒

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发表于 2009-9-18 10:38 |只看该作者
剪碎组织后胰酶消化
3 |+ P5 O7 v6 x& }; F5 p接种密度考虑降低!
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发表于 2009-9-19 10:19 |只看该作者
我也有这样的情况。我的细胞是从协和买的P1代,买回来的时候形态都是很好的,但我传了2、3次左右细胞就出现各种形态,而且死了很多。
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发表于 2009-9-22 23:21 |只看该作者
看到你的照片上有许多小黄点,是否每天在增多,但是培养也是清亮的。我觉的像真菌污染。
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发表于 2009-9-25 20:25 |只看该作者
如果是胎鼠,一般建议用酶消化法分离成纤维细胞,如果是幼鼠或者成年鼠用组织块法。7 f) b, m; k( W( x
估计,楼主的培养液可能有问题。你可以试试用你那个培养液培养一些建系的细胞看看。当然,也不排除污染。
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发表于 2009-10-20 05:45 |只看该作者
同意此意见

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发表于 2009-10-21 16:12 |只看该作者
原代mef不能长得太密,70%满就要及时传代。后面两张图片的细胞形态缺失奇怪,窃以为是分离MEF时其他组织去的不够干净,掺入了其他类型的细胞
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发表于 2009-10-28 17:28 |只看该作者
看看 我找的原因对不对 。
: u) p  t/ Y* x) P  ~
; v' P0 R* b3 C( c0 K& ]  w4 e我最近一批的细胞和你最后两张的图片很相似 。 原因是 ,做原代培养的那天晚上 CO2 没有了, 培养箱 2.7%左右的 CO2浓度过了一晚上 。第二天就看到有很多的细胞脱落了。  z! w# S# k! Y" [) T* R0 D# a: ]
这个 可能是 一种不正常的状态 ,至于 培养瓶里的没有问题, 原因可能是 你的盖子拧的较紧,所以环境改变不太敏感 。
" N3 P" Y! S8 a  N8 v1 x& \
8 K; C4 l4 F' k! Q6 T) n) U看看co2 培养箱有没有什么问题 。   这个只是猜测 。
$ t. e5 |+ g) r' X* k2 ?
& i8 y4 E, U. {5 J$ \ 出了问题是很麻烦的事情,每一步都要考虑到。
. x3 L7 e5 k# W' J+ v1 a$ }" l1 a. ^7 ^$ \, ^# }5 r
现在看来养个 MEF很容易,但是养好了 也不是很容易的事情 。
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发表于 2010-2-18 00:50 |只看该作者
学习了
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