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请教DC细胞培养问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-8-11 15:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近培养的DC细胞在贴壁培养24小时后出现大量黑色渣滓,贴壁的DC细胞也几乎全部飘起,2天后DC细胞全部死亡,有没有高手帮我分析分析原因。DC细胞贴壁时间1.5h,加GM1000U/ml、IL4 400U/ml、自体血清5%(56度灭活),这个体系之前做过很多份样本,只是最近遇到这种问题。

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沙发
发表于 2017-8-11 16:11 |只看该作者
附上拍摄的照片
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

藤椅
发表于 2017-8-11 16:43 |只看该作者
我说就不要加自体血清了,换成Xvivo-15,GM和IL-4都加到500IU/ml就ok,贴壁时间可以适当延长,过夜也可以的~试试看
% C4 j1 T3 m* I0 K如果之前重复多次没问题,很可能是这一份样本质量不好

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板凳
发表于 2017-8-11 17:48 |只看该作者
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回复 baby00000003 的帖子
( Q! g- d$ U# {* t& s' `- S  s; o! `2 m( C1 }' }( p) G  u1 v3 Q' }
请问Xvivo-15是什么东西?谢谢

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报纸
发表于 2017-8-11 17:49 |只看该作者
回复 1538238029 的帖子8 ^8 p1 S& d# \* W

( D( d: l% V% b0 @6 O' A有没有可能是移液管外侧掉下的喷漆,就是刻度那个?

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包包
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地板
发表于 2017-8-14 14:43 |只看该作者
回复 anzhida0823 的帖子
6 _0 ?3 E; c5 M9 d# j2 [7 v3 f& q0 M; `( Z+ o4 H' ^
培养基

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发表于 2017-8-14 15:10 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子
. r! H8 \1 D# M7 y7 z! `( N' p! E9 @  L. P9 f0 b/ c. e
恩,谢谢!

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发表于 2017-8-16 11:27 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子
" v- ]) u# D9 {" e/ A& u& l( ~& o3 g( Z0 ^! |
自体血清真的很脏,后面一份样本单独培养了一下血清,瓶底都是渣

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发表于 2017-8-16 11:29 |只看该作者
回复 anzhida0823 的帖子
6 d3 g( Z0 t+ x+ ~! S
6 G2 c+ n% z' s- L/ `6 h( r# k7 }不是喷漆,镜下观察是类似于细胞凋亡形成的残骸,而且喷漆不可能掉这么多的

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包包
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发表于 2017-9-18 16:47 |只看该作者
这样看很像污染吧,对了,你是分离的什么来源的DC呀,为什么要加自提来源的血清,我们就加的GIBCO的High-Inactivty的血清咧
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