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免疫细胞分离、冻存困境 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-9-5 09:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教各位大神,我分离的脐血白膜细胞和外周血白膜细胞利用cellbanker冻存,密度1x107,复苏后细胞少的可怜,只有2x106,冻存前细胞分离完还有部分的红细胞和血小板,是我冻存有问题还是分离的细胞不纯影响更大啊?如果说不纯,大家有更好的办法去掉红细胞和血小板吗?红细胞裂解液用过,效果不佳

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包包
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沙发
发表于 2017-9-5 10:55 |只看该作者
这个问题也遇到过,个人认为是因为细胞纯度太低导致的,红细胞去除只能用裂解方法,但不一定要裂解液,可使用少量灭菌过的超纯水吹打几次,时间控制在5-10秒,再加生理盐水,离心;血小板也可通过离心去除。这种方法只能减少,不能去除干净,希望能帮到你

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包包
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藤椅
发表于 2017-9-5 11:04 |只看该作者
沉降的时候没处理好吧,是否沉降足够时间等等,吸上清也要注意,别把红细胞给吸上来

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包包
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板凳
发表于 2017-9-5 11:31 |只看该作者
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其实冻存前红细胞和血小板多没关系,你复苏以后洗两遍就干净了,然后你的活率有多少?
% q: D7 z" c6 Y5 R8 O# W

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包包
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报纸
发表于 2017-9-7 21:56 |只看该作者
养几天红细胞就少了,一般不是特别多的话不影响免疫细胞的生长
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