有没有人做过细胞转染的啊？

youyou315

提取质粒的柱子可以在55度烘箱烘一下预防支原体，因为一般支原体42度即可杀灭，elute buffer 过滤除菌，质粒提取完后可以用液氮冻一下，不影响转染。

枕头和书

质粒酒精沉淀那步以后是关键，要注意保持无菌，有条件可以在独立的超净工作台做。

janeyu

一般试剂盒提的都不会污染的，Lipofectamine 2000好像说转染前的细胞要没有抗生素培养，不过即使在有抗生素的环境里培养也不怎么影响转染，可能这因细胞而异吧，所以你可以试试培养基里加抗生素。

john8707

质粒的质量很影响转染的效率！！
5 \) r; w& f- U0 C* s+ [! B0 Q2 X我们用的去内毒的试剂盒，QIAGEN的，质量不错

yueyongheng

我们用盒子提质粒也一直是在普通环境进行的，没遇到过污染问题。

hdc2001

1、超净台里操作；  }8 x$ }% ?9 l2 z% m# Q$ |8 F/ @; S
2、严格无菌操作；就当养细胞一样；只要做到这2点，不可能污染。

ghfvcat

乙醇洗涤的时候多泡一会儿，再牛B的细菌也挂了，质粒不小心污染了的话重新用乙醇沉淀一次就行

gaorongbest

在超净台中手提的,没发现过污染,放心吧!

djj01

有必要的话，操作所用容器保证无菌，最好低温保存，可避免细菌污染！

janeyu

我们之前也出现过类似情况，后来就用了高纯度的质粒提取试剂盒提取情况就改善了，或者用大题方法提取的质粒纯度也比较高，用的试剂最好是新开的，操作过程中尽量避免污染情况。