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做iPS的同志们,谁能帮我解释一下这段话啊? [复制链接]

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优秀会员 金话筒

楼主
发表于 2009-10-22 17:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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1,针对每个10cm plate,use 10ug of FUW-tetO-cDNA (Oct4, Sox2, Klf4 or c-Myc) lentivirus backbone with 2.5ug of pMD-G and 7.5ug of pPax2
  i& Q: J/ |" v4 z2 ?/ f% u8 M2,While aliquoting the three plasmids into a tube,deliver 30ul of Fugene 6 transfection reagent into a second tube containing 500ul of DMEM without serum and mix gently by finger tapping and incubate for 5 min at room temperature
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优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2009-10-22 17:05 |只看该作者
红色标记的名词都是什么意思啊?帮忙解释一下) G- U1 l9 Z' W- l! p# S
在这里使用具体有什么作用啊?
/ ]1 k+ v" B% @- b1 m/ s我是外行+ }" T, L1 `+ l* N- z
呵呵
8 V, u" _" l  N/ C/ N: `! S1 ~0 `Oct4, Sox2, Klf4 or c-Myc就不用解释了
& b+ U- B0 U! |8 k; J2 h5 K
( q) X; i3 B( V+ G+ gdeliver是不是“添加”的意思?
! D7 |/ Z3 d/ `5 E! F9 V+ R好像以前没见过这样用的

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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2009-10-22 17:29 |只看该作者
这个好像是用 的 四环素的 系统 , 四个基因在一个载体上,另外两个质粒是慢病毒的包装质粒。  所以有三个 质粒。   fugen  是 转染试剂。  
, w( a3 C1 e# C: Z3 h/ C# M! l5 `2 g2 p5 c' I

$ W# V$ M+ P$ C7 q8 P; W" ~我理解是这个意思
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发表于 2010-3-5 21:18 |只看该作者
FUW-tetO-cDNA 应该是质粒的骨架, pMD-G and pPax2应该是病毒包装的包装质粒
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