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求问人胚胎干细胞转染的好方法? [复制链接]

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楼主
发表于 2018-1-3 10:12 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
养的人胚胎干,尝试过慢病毒和电转,慢病毒感染荧光蛋白效率在5%-10%,电转仪电转效率 不到千分之一,用的是NEPA 21电转仪。5 F' I0 I" x: r4 r  ~
大家有什么好方法转染人的胚胎干吗?

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沙发
发表于 2018-1-3 12:50 |只看该作者
杆状病毒,转染效率能达到90%以上。

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藤椅
发表于 2018-1-3 14:35 |只看该作者
本帖最后由 时一清 于 2018-1-3 14:50 编辑 + u5 ?, M  g" N
7 a- P' J8 I$ |# ?, k
回复 niliu730323143 的帖子' w' N$ m6 t" G3 e! Z; |
& {. |6 ]  R0 G0 C( d( e
多谢多谢!请问你用的是SF9包装的吗?杆状病毒可以像慢病毒那样稳定整合吗?

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板凳
发表于 2018-1-3 17:04 |只看该作者
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回复 时一清 的帖子( b, S9 [& d2 y
+ j- c1 X) T8 x( C: i
不整合,可以用SF9包装。

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报纸
发表于 2018-1-15 14:35 |只看该作者
回复 时一清 的帖子
- \& `9 ~+ x; F! o8 F' F
0 e3 q: I1 @3 o  ^. [4 h. R6 X* [找到问题了,用的启动子是CMV的,换成CAG启动子后电转可以有60%的效率

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地板
发表于 2018-2-28 18:13 |只看该作者
回复 时一清 的帖子" {1 j/ v8 }3 P0 F$ ~% t! L
% A' }# B$ y4 P0 ?1 k/ w
楼主,你好,你用慢病毒是怎么感染的,就直接加病毒吗,能不能告诉下方法,我养的H9 free的细胞,现在一感染就死
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