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楼主: jianlindunev
go

[请教] 请问我拿到国外同行给邮寄的载体质粒后如何操作   [复制链接]

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11楼
发表于 2010-9-29 18:29 |只看该作者
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建议先不要完全剪下来!留一点备用!剪下来的用TE溶解!
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12楼
发表于 2010-9-29 23:34 |只看该作者
回复 10# wuxiao101325 / _) a6 s# X3 _
- i- F" A) u" p. b

* b0 W; P* M$ w    你要是看到了你就知道了,那个DNA就是保存在滤纸上面,干燥了之后什么都看不出来,用信就能邮.不过addgene怎么邮就不太清楚了,估计是保存条件更好的吧。
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13楼
发表于 2010-9-30 08:53 |只看该作者
回复 12# shewawa % I' O! P( ~; a: _3 C1 ^0 M
谢谢

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14楼
发表于 2010-10-17 15:32 |只看该作者
用剪刀将圈圈直接剪下,用镊子将其卷成圆柱形放进离心管中,加入无菌纯水后,4度过夜。如果有分光光度计的话,可以在第二天先吸取1-2微升测下浓度,同时可以跑个电泳鉴定下质粒信息是否与提供者提供的一致。如还不放心,可以直接送出去测序或者是根据浓度计算做转化所需的最佳质粒溶液体积,经过转化后送菌液或是提取质粒后送质粒测序。如果送质粒测序,一定要送无菌纯水洗脱的质粒。希望对你有帮助。
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15楼
发表于 2010-10-19 09:00 |只看该作者
ding

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16楼
发表于 2010-10-19 19:41 |只看该作者
剪取相应圈圈部位部分或全部视情况,再用超纯净水中或TE中溶解分离转化,提取做鉴定!
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17楼
发表于 2010-12-10 23:27 |只看该作者
回复 jianlindunev 的帖子
- _/ i- D: s# T; _& Z$ K  X4 u* {+ t$ R' Q
你是通过给国外同行发邮件获取的吗?国外同意邮寄后需要办理啥手续不?
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18楼
发表于 2010-12-11 08:03 |只看该作者
回复 wuxiao101325 的帖子! s% L' o( k8 Y) T
; [/ z* |5 U+ B: `: [& E, Z% Y
我们这边经常寄,如果是寄纸片和EP管,报关的时候就报塑料管和纸片就行了。, z8 m" [" P4 I, w
如果是要质粒溶液,报关就要报核酸,不然手续很麻烦,三天两头就要你解释。。。
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19楼
发表于 2010-12-13 10:53 |只看该作者
我收到过是干粉状的,要先4度离心一下然后用缓冲液稀释就好啦,TE,甚至无菌水都可以,用之前先提个质粒看一下吧
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