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内容简介+ O& C7 G; W- n( `
* ?5 @ Y! ?: ]# s- E. b
本书分为三篇,原理篇主要介绍了流式细胞术的原理和质量控制方法4 P$ k# c( [6 h8 q6 h+ x
! b" V9 g, U; y
;操作篇详细地介绍了流式细胞术细胞悬液的制备,以及在具体的各项应
8 c" [. h* A! \4 `% L8 w* }) u1 ~6 f" G
用中流式细胞术的操作方法与技巧:常见问题解答篇采用一问一答的方式5 C$ ?; ~& E4 l7 ]7 c
! K0 |3 f4 `+ P! a) t( y7 s. w,根据编写人员的实践经验,对流式细胞术中常见的问题进行详细解答。7 `& O. }$ Z; E0 R; n
2 ?% {( P$ }, k" L
/ q9 V- A/ T3 c+ q; r2 S基础篇
1 c! I) Z# q1 v; T9 r \
/ @3 f' y7 B0 k$ }; Y第1章 流式细胞术及其原理" E. B0 B# a- _, R: C
) }/ N4 A) i3 ^5 t; U! l! D' ]; j- D
1.1 流式细胞术
) k& N6 P- e1 C1 w
$ R! n' R' L+ ~; \4 e; B1.2 流式细胞仪的基本结构
! S( o" v1 m5 m2 w$ W% K
5 y% D! N- s2 M1.2.1 液流系统 U; W- T, x) R% X9 j6 G. _5 i7 B
1 G/ g. ?* ^1 ^* a+ {+ U
1.2.2 光学系统
2 U7 S0 h% h# Y- L N7 G' e0 D, @$ b0 L0 Z' W; c& H: P
1.2.3 电子系统
$ M8 Z# e1 z, N4 I- L; m; q% m5 F4 c7 ]
1.2.4 分选系统0 I; o2 |' i" P# a4 J7 P
* ? V$ s* F3 a: z9 e; ^1 f- m
1.3 流式细胞仪的主要技术指标
: D4 h3 |* ^& @* D3 ?" X, {. k5 z" G |% O/ c
1.3.1 荧光分辨率
\2 |$ j/ g2 G+ P- M+ N/ d: B" Z* x& P+ W& k* M- q1 K
1.3.2 荧光灵敏度
* r6 ?" {; u3 z! u( k: y- ^6 N" A/ j% o! Z
1.3.3 前向角散射光灵敏度
7 x- n" m6 }( Q A* G5 c
% O: @# n2 j- X0 g. s7 s$ P; }1.3.4 分析/分选速度
9 C, Q+ V2 B: {9 g/ R
# t' J5 D- B* t7 t6 a6 L1.3.5 分选纯度# [# v9 e+ t! B, I) a4 r
) o4 q3 ~ R. t; E. _
1.3.6 分选收获率
" C+ ~, v" s5 x; p8 Q
7 n L2 l7 ^9 |参考文献
/ b1 k; l) T9 B7 K/ }0 C. i3 F
, I5 L+ h- S! v7 A6 z2 p9 ~. e第2章 流式细胞术的质量控制
1 D* v1 R! t6 s- M: a3 M, P* F
! b6 }" T: ^+ e2.1 环境要求
9 S0 y+ r) Q/ j, J& }, M
?- v, p. @, a N! T% s' m7 r3 N$ H/ a2.2 仪器的校正. o: J/ Q& _ d4 \7 H8 p
" s2 K- D* b- h0 M5 n' T: E3 q2.3 样本的要求
) U' f& M" P- O1 M% {" l" z* g' m) l2 H& U0 Z
2.4 合理设计对照& f! L( y; n5 }" A; m" X3 Q
* ~* k, i' z3 t" u# d2.5 获取实验数据和分析
2 C8 l' d; P/ e. y# u5 A( S" K3 d! V1 m4 ?/ E5 e3 b. Q
参考文献" E9 \- V/ U2 f7 t! L$ v* N
6 V& b% j4 V6 s# y& R7 S操作篇% T2 N9 ]% q5 B
: Q' q3 c" B- N8 {8 L7 B第3章 流式细胞术单细胞悬液的制备
: D& i& a+ |" f/ H+ v4 v2 f( `) C, u) ?# a5 _
3.1 单层培养细胞分散为单个细胞
5 r7 b' t! r9 ?, H4 y8 G% f) }
" q6 g0 O+ ~2 y |+ c3.2 新鲜实体组织分散为单个细胞
9 v) ?2 [. \* B1 O: @. Q1 j0 k3 T8 Z, W' T0 R
3.2.1 机械法* V. D- h& n2 K2 W7 k
4 u" n; `/ O4 d# \; K+ }3.2.2 酶处理法
: w% g0 x8 l1 y& B$ C8 S2 u, E. B0 w) S6 d
3.2.3 化学试剂处理法
- I) d5 ?# `: q1 w1 |0 Z% F4 a; E! \: w: M4 p0 s9 F8 W6 ]& g3 C- @' u8 m
3.3 石蜡包埋组织分散为单个细胞# e, L7 k- M$ [$ _8 J0 U+ l P
0 Y) n& _% ^* i% p3.3.1 二甲苯脱蜡法& K7 O+ U/ }1 ]/ z8 Y7 l7 P
9 s. o. H6 ~$ h
3.3.2 组织清洁剂脱蜡法
8 [1 X0 C: `7 p4 d8 w: C; h2 ^* s3 i5 _' f- D T7 x( Z
3.3.3 甲氧一双氧水处理法1 A4 x5 G) J$ t/ r. U$ R
9 h! C& Z$ S/ c
参考文献
3 p6 b: E+ e6 Q8 c" M! S! }, S8 x g5 L7 B0 u
第4章 流式细胞术的应用0 z# G3 U3 v# S& O/ x5 u$ e- S1 ^
2 `3 l3 w2 K% A ?$ f
4.1 细胞周期和DNA倍体分析
- ]$ a: L# Q: Z }
: @8 U' J. `& M' { M8 N: q6 b2 C4.1.1 概述
8 l/ W9 F. d' z
* \& j: O4 l/ l" w; {, |3 U& R4.1.2 荧光探针
+ K# A% b" z9 F" m- h* @! m& ~+ \+ _+ j
4.1.3 DNA检测的常用术语7 a1 `' {! y4 h, w( y2 a
' C# L: E9 w1 O; G4 W4.1.4 样品制备6 m: ?, H/ b% L% J" |% {1 e' P
( M9 z( |; |* f0 B% t
4.1.5 上机检测(以PI标记的标本在BDFACSCalibur流式细胞仪检测为例)
4 k. b7 a& |) ~9 C7 M+ x
' S; ?& t" \+ O# U( c& g! h* J+ d: H4 J3 B4.1.6 数据分析, R. P6 @3 r; S1 e T
: ~3 Q; O9 M% i! r$ g; H4.1.7 注意事项
' W4 j/ s$ H; C4 z1 c% J& T7 c6 f4 B
4.1.8 应用举例
2 y. n/ a8 F0 O* {' e" w* i% e; ^5 \; r1 d! K4 e
4.2 DNA的双参数分析 v9 q z$ G( L0 D+ N/ H
; w* n: u8 a; W; W, {; T: l4.2.1 试剂
# h& Q1 W; o( b6 o2 D
$ o% U+ A% g# l, O$ x3 P2 c- I% G4.2.2 样品制备- x7 m- s& Q. i. I0 l
8 b t. F, e( a+ L4.2.3 上机检测3 |' R* {) G- p# E" X5 ?, l4 m
. P" s; b P8 @0 A+ k" w* _
4.2.4 结果分析
6 T9 o: U3 a, N8 r1 I, ^, \3 x( Z8 U0 w
4.2.5 注意事项
" e3 `+ v- S' m. D( _8 y9 j
' b+ c9 ^8 k5 m- M" `; ~8 X6 J4.3 凋亡检测
7 Q. w* y v3 W) @% ^1 m( ^/ r
. X- k4 H8 X2 j4.3.1 凋亡的诱导7 Y' W2 H+ Q- c; D7 x! m8 c- g
* z. j/ t' g9 [. `. A# o
4.3.2 细胞凋亡的形态学分析
, |- O$ V; f9 k0 |& u% u: D$ h8 {9 H+ ~6 J: {( I3 t8 P4 z0 ^# [
4.3.3 AnnexinV凋亡检测法
4 r, N' R7 n; J+ h& t
' R$ S3 f' X8 h: L/ X) j9 O* ~) `4.3.4 caspase一3分析
( o2 ]3 r( q- \9 `0 }8 ]0 j& L) L) ]9 P' q1 `& \
4.3.5 碘化丙啶(PI)单染色法* x% U3 W% N" W6 _+ D) h
/ }- J4 a4 T" p8 F7 Y1 l
4.3.6 线粒体膜电位的检测 o8 H, c9 g! e# W( J3 Y
+ `( f4 W: a; w, Q4.3.7 细胞内活性氧的检测
4 g+ L$ O2 z! f0 `' c
' {8 ?& R5 U9 z6 N/ w, ? c4.3.8 DNA片段检测
k* |- w6 C3 W; N; `+ J$ E# ^; `$ B9 |+ s
4.4 肿瘤细胞多药耐药检测; B# s6 w4 u0 f! `7 q/ V+ F( O
( T+ o9 c h/ [' Q
4.4.1 细胞表面膜糖蛋白表达水平的检测1 s% r5 `9 u- u! x% V' p' U# F2 |
# M5 |4 Y6 n, k+ _; o4.4.2 罗丹明123蓄积实验
; C0 ^/ ~ i, F+ P- ^8 e i; E" {3 s4 \* P& G! e9 o: n
4.5 细胞免疫表型分析4 k1 }4 H* [" Y. ~/ B
' H' ~% ]4 C( ]
4.5.1 概述
3 V+ X6 H3 I. z; D
2 l$ W6 a( d2 t- {$ V N4.5.2 淋巴细胞免疫表型分析9 M! X5 r5 k1 V' J
8 {$ Z* `4 a9 X2 C' Q' `/ \$ f
4.5.3 应用举例
9 |% ?- _# W0 N7 C- c- h& B1 s+ E5 v8 S7 } n
4.5.4 影响免疫表型分析的一些问题
- E; @/ ^- h; y% n1 s& ]& N" e( O% U/ G M7 Y' |
4.6 细胞因子的测定
4 l/ E: M, w, f& |; d: {# V/ }/ F `! C
4.6.1 细胞内细胞因子检测
& ]/ \" b& X4 X& ^1 f
" W' j7 H4 F# ~* a$ U# S! Q. p4.6.2 流式微球分析(cytometric beads array,CBA)法检测细胞外细胞因子3 H& _! G ?' l& N8 U9 z4 F
9 R4 ~1 D- S, V. B6 j6 V% a
参考文献. b* T* Y$ v6 \) r9 M
$ p7 @" L: l& Z常见问题解答篇
+ w# Q* ], A, W o3 K t& T
. L8 w3 G" U& Q* F |
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