FACS，双标记问题

bffgbgff

做FACS,直接标记法做双标记的话，应该如何设置对照？

yuheng

一般要设两个补偿和一个双同型对照

yuheng

至于补偿如何设置，这篇文献说的很清楚

luckyfool

有同样的困惑

Hongwu

好好看看，要做此方面的实验

namulow

求脂肪干细胞成骨标记方法

catheryne

以FITC-CD4和PE-CD8为例：对照管一般设三管：
. @8 u& r5 H& _0 {9 S第一管：FITC-IgG和PE-IgG，阴性和阳性细胞分群2 y* t2 d. Y, O" [; k9 P7 B
第二管：FITC-CD4和PE-IgG，调PE-FITC补偿
2 J; v  Y% ]8 ]7 O7 m9 q第三管：FITC-IgG和PE-CD8，调FITC-PE补偿0 B6 w, L/ V/ M9 `
检测管：FITC-CD4和PE-CD8双标

gandanxiaoyang

流式结果的好坏以及可信度与对照的设置关系密切。
8 G' S9 z! W4 ]. N一般说来，空白对照（即空细胞）是必须的，另外直接标记抗体必须有同型对照，间接标记的抗体至少需要只加荧光二抗的对照。
3 }6 t' ]" j7 y! o多色标记的实验，尤其是一根激光器激发的荧光抗体（如FITC与PE或PI双标）,必须各做一管单独标记，因为需要调节补偿。. c7 [4 g5 ]$ h. w. x' g
如果不同激光器激发的荧光（如FITC和APC双标），细胞数量不多时可以不做单标组对照，因为基本不需要调节补偿。
3 d# f7 ~. ]3 }5 n* l; u但严格的实验，空白对照，同型对照，单标对照是需要的。只有这样，流式的结果才是可信的。