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基于分子生物学操作的新型技术轻松解决iPS转化问题(附原文)   [复制链接]

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小小研究员

楼主
发表于 2010-2-25 11:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-2-25 12:34 编辑
* {1 g$ d4 m4 \3 H' O
- a3 F) C9 |  n3 @% o+ F干细胞技术可以说是继生物克隆技术、基因工程之后的第三大生物科学成就——先后有三位科学家因之而获得诺贝尔奖。目前供实验室研究用的人类干细胞有四种获得途径,其中近期最受关注的就是由成体细胞逆转获得。
) I; p% a$ Q+ J  H) C* F' [6 o) P9 S
这种诱导式多能性干细胞(iPS)技术如果能够在人类身上试验成功,那么就将回避长期以来围绕人类胚胎使用问题的政治和伦理争论,因此被认为是干细胞研究领域的一项重大突破。 - J) U' ~$ s! n1 t; o2 D6 z

6 L+ f' o  B$ x/ O0 z7 s- X3 f3 k# Y# X1 I# Q! Y) w
但是经过这些年来,科学家们的全力研究,iPS技术还是存在一些令人无法回避的问题,譬如引发致癌基因活性的问题,譬如转化率的问题,譬如转化过程繁琐的问题,譬如组织特异性的问题。, V0 g# \. V. g  {; r+ Z1 R! M4 x
& \7 S$ z8 ?" ?
近期来自斯坦福大学医学院心血管与放射医疗系,生物工程系等处的研究人员发文提出了一种不同于常用技术(基于病毒载体转化基因)的新方法(基于分子生物学操作),这种方法能快速,简便的将人类脂肪转化成多能干细胞,他们利用脂肪干细胞培育的iPS细胞通过了有关测试,它们能够分化成人体内的神经细胞、肌肉细胞以及肠上皮细胞等。此外,利用脂肪干细胞培养iPS细胞不需要饲养细胞,这无疑提高了其安全性。这一研究成果公布在2月的《Nature Methods》杂志上。
3 X5 o) W% P) K4 h4 {1 S- V/ P4 y0 j
这是首次完成的不同方式重新编程细胞,这种方法的简便性,以及相对安全性能帮助研究人员获得FDA的批准,斯坦福大学Michael Longaker教授表示,“这种方法不仅安全,而且简单”,“这能帮助全球的实验室进行更为方便的干细胞研究,我们正在申请应用到临床的再生医学上。”
! `9 f  e3 }# f5 l% o
* q. I; I1 q9 X! F5 c2 X斯坦福大学的这种方法原理是利用所谓的微环(minicircles),即一半是由重新编程细胞(诱导人类脂肪细胞转化成多能干细胞)所需元素构成的DNA环。8 Y5 V/ z8 P" H( Y* i3 {
, F) i2 k+ I5 \9 A1 B% i! @
这些微环重新编程载体由于只是由四种重新编程所需基因组成(另外添加了一个绿色荧光蛋白——用于追踪微环细胞),与和那些大型的,更常见的质粒不一样,这些微环不携带细菌DNA,这意味着它们携带进细胞的外源基因更少,而且这些微环基因的表达更好,更加小型也能帮助它们更容易进入细胞。另外由于这些微环遗失了细胞分裂的相关基因,因此不能复制,从而保证了稳定性,也更加适合用于医疗应用。
6 C& l8 Z& \5 X+ y3 n: c, v- u% N) `
这项研究最初研究人员计划是利用这些细胞,治疗人类心脏疾病,文章的另一通讯作者Joseph Wu说,“想象一下,利用从心脏缺陷的家族成员中获得的脂肪或者皮肤细胞,重新编程成多能干细胞,然后诱导成心脏细胞,这比直接从患者心脏中提取样品组织,要更加容易和更加容易培养。”& n5 ^& d* Q8 e3 s4 E
; E3 r. \2 a& F! o4 v
A nonviral minicircle vector for deriving human iPS cells
4 `' h! {7 u$ N& Z6 |4 Z9 D
. l0 Y1 s+ n" |' yOwing to the risk of insertional mutagenesis, viral transduction has been increasingly replaced by nonviral methods to generate induced pluripotent stem cells (iPSCs). We report the use of 'minicircle' DNA, a vector type that is free of bacterial DNA and capable of high expression in cells, for this purpose. Here we use a single minicircle vector to generate transgene-free iPSCs from adult human adipose stem cells.
( n, i( r/ X# |$ e3 m1 @& T0 }! f  S7 a" w  Z: l+ M
3楼原文 感谢上海过客提供

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沙发
发表于 2010-2-25 11:51 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2013-11-20 21:36 编辑 0 E0 r% q8 U( x; N& K: V
4 f* U5 G. d% [& X1 h% ], x
A nonviral minicircle vector for deriving human iPS cells6 K3 j) F( Q/ W3 F1 b# I+ t
有这篇文章吗?小弟想学习学习+ A; D" X8 |) j, Z; `4 C1 u5 w; a

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藤椅
发表于 2010-2-25 12:28 |只看该作者
传上来 吧 ,  楼上 是   陕西 那个学校的啊 。 PM下
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细胞海洋 + 10 + 20 极好资料

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板凳
发表于 2010-2-25 12:56 |只看该作者
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Thanks for sharing!

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发表于 2010-2-25 13:20 |只看该作者
thanks

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发表于 2010-2-25 14:09 |只看该作者
多谢分享!

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发表于 2010-2-25 14:19 |只看该作者
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发表于 2010-2-25 18:49 |只看该作者
thanks a lot!

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发表于 2010-2-26 09:52 |只看该作者
Well done!

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发表于 2010-3-15 11:49 |只看该作者
多谢多谢!
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